| 黑色素浓集激素受体2基因siRNA重组腺病毒载体构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 张琴,袁成福,卜友泉,易发平,武向梅,袁飞,秦琴,宋方洲. 黑色素浓集激素受体2基因siRNA重组腺病毒载体构建及鉴定[J]. 医学争鸣, 2008, 29(15): 1364-1367 |
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| 作者姓名： | 张琴 袁成福 卜友泉 易发平 武向梅 袁飞 秦琴 宋方洲 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,重庆400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，重庆市自然科学基金，国家外专局资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建黑色素浓集激素受体2(MCHR2)siRNA重组腺病毒载体,并在稳定表达MCHR2的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中鉴定其干扰作用.方法:人工合成靶向MCHR2的siRNA干扰序列,用分子克隆的方法克隆到穿梭载体pSES-HUS上,得到pSES-HUS-MCHR2siRNA,并与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,得到pAdeasy-SES-HUS-MCHR2siRNA,在HEK293细胞中包装成重组腺病毒,感染稳定表达MCHR2的CHO细胞株,RT-PCR及Western Blot检测腺病毒对细胞MCHR2表达的影响.结果:成功构建McHR2siRNA重组腺病毒载体.MCHR2siRNA重组腺病毒显著抑制CHO细胞中MCHR2的表达.结论:构建的Adeasy-MCHR2 siRNA腺病毒能有效地抑制CHO细胞中MCHR2表达,为研究MCHR2的功能及其与肥胖的关系提供了有效的工具.
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| 关 键 词： | 腺病毒载体 黑色素浓集激素受体2 RNA干扰 |
Construction and identification of human MCHR2 gene siRNA recombinant adenovirus vector |
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| ZHANG Qin,YUAN Chen-Fu,BU You-Quan,YI Fa-Ping,WU Xiang-Mei,YUAN Fei,QIN Qin,SONG Fang-Zhou. Construction and identification of human MCHR2 gene siRNA recombinant adenovirus vector[J]. Negative, 2008, 29(15): 1364-1367 |
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| Authors: | ZHANG Qin YUAN Chen-Fu BU You-Quan YI Fa-Ping WU Xiang-Mei YUAN Fei QIN Qin SONG Fang-Zhou |
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