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戊型肝炎病毒ORF2重组蛋白的克隆表达及初步应用
引用本文:阮冰,王淑颖,陈勇,庄辉,马亦林,干梦九. 戊型肝炎病毒ORF2重组蛋白的克隆表达及初步应用[J]. 中华传染病杂志, 2003, 21(2): 101-104
作者姓名:阮冰  王淑颖  陈勇  庄辉  马亦林  干梦九
作者单位:1. 310003,杭州,浙江大学医学院附属第一医院
2. 杭州市第一人民医院
3. 浙江省医学科学院
4. 北京大学医学部微生物学系
基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 396 70 6 6 6 ),浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项科研基金资助项目 ( 1999年度 )
摘    要:目的 研制戊型肝炎病毒重组抗原诊断试剂。方法 用融合蛋白表达载体 pGEX 4T 3 ,表达戊型肝炎病毒第二开放读码框架 (ORF2 )近 3′端 492bp片段。结果 经酶切、聚合酶链反应(PCR)及序列分析鉴定 ,证实重组表达质粒 ( pGEX 4T 3 HEV)构建成功。重组体菌株经异丙基 β D硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达 ,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE) ,在 46× 10 3处见一蛋白条带。该蛋白经Westernblot分析 ,能与 1∶10 0抗 HEV阳性血清起特异性反应 ;应用于ELISA诊断 ,与Genelabs公司重组抗原抗 HEVELISA试剂盒比较 ,一致率为 96 .9%。结论 该克隆表达产物可用于制备戊型肝炎重组抗原诊断试剂。

关 键 词:戊型肝炎病毒 ORF2重组蛋白 克隆表达 应用 序列分析 酶切 聚合酶链反应
修稿时间:2002-05-10

Expression and diagnostic utility of recombinant ORF2 protein from hepatitis E virus
RUAN Bing,WANG Shu-ying,CHEN Yong,et al.. Expression and diagnostic utility of recombinant ORF2 protein from hepatitis E virus[J]. Chinese Journal of Infectious Diseases, 2003, 21(2): 101-104
Authors:RUAN Bing  WANG Shu-ying  CHEN Yong  et al.
Affiliation:RUAN Bing,WANG Shu-ying,CHEN Yong,et al. Department of Infectious Diseases,First Affiliated Hospital,Medical School of Zhejiang University,Hangzhou 310003,China
Abstract:
Keywords:Hepatitis E virus  Reading frames  Cloning   molecular  Polymerase chain reaction
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