| 摘 要： | ｃ－ｍｙｃ基因是调控细胞增殖与分化的癌基因，在急性白血病细胞株及急性白血病、恶性淋巴瘤患者细胞中出现高表达，是影响这些恶性肿瘤发生、发展的重要基因之一。反义核酸治疗恶性肿瘤在技术上具有高效、简便、不需载体等特点，原理是根据碱基互补，将具有特异序列的反义寡核苷酸导入肿瘤细胞与靶基因上的相应部位结合，抑制和阻断相应基因的转录表达。 目的 应用针对ｃ－ｍｙｃ基因的两个反义核酸１５ｍ ｅｒ和１８ｍ ｅｒ作用于急性白血病细胞株和原代细胞，研究反义核酸对白血病细胞的生长、增殖，ｃ－ｍｙｃ ｍ ＲＮＡ 表达以及Ｐ６５ ｃ－ｍｙｃ蛋白表达率的改变，以及对细胞凋亡、分化方面的影响。 方法 采用锥虫蓝染色法测定细胞的拒染率，绘制细胞的生长曲线，用０．８％ 甲基纤维素半固体培养法进行克隆形成试验；用流式细胞仪检测在反义核酸作用前后的Ｐ６５ ｃ－ｍｙｃ 蛋白及凋亡率；用ＲＴ－ＰＣＲ 法检测ｃ－ｍｙｃｍ ＲＮＡ 的表达相对水平；电镜观察凋亡细胞的超微结构；ＤＮＡ 电泳分析凋亡片段；光镜下瑞特染色、ＮＢＴ染色观察细胞分化水平，流式细胞仪检测分化抗原表达，同时ＲＴ－ＰＣＲ检测分化细胞的ｍ ＲＮＡ 表达；ＭＴＴ 法检测反义核酸与化疗药物对细胞联合作用后对
|
