| 人CYB5R2基因真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 余娜娜,杜春平,肖 雪,侯 波,黄光武,张 哲.人CYB5R2基因真核表达载体的构建[J].中国临床新医学,2011,4(8):695-699. |
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| 作者姓名： | 余娜娜 杜春平 肖 雪 侯 波 黄光武 张 哲 |
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| 作者单位： | 广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,南宁,530021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建人CYB5R2基因真核表达载体,并观察其在人鼻咽癌细胞HONE1中的表达.方法 根据表达载体pCMV-Tag3A上的多克隆位点和CYB5R2基因CDS序列设计引物,应用RT-PCR从人睾丸cDNA中克隆出CYB5R2的CDS,并进行TA克隆.对经PCR、双酶切和双向测序验证正确的质粒,进行CDS目的 片段的回收,将其连接于pCMV-Tag3A载体的多克隆位点内构建真核载体,然后进行PCR、双酶切和双向测序验证.脂质体法转染鼻咽癌细胞HONE1细胞,荧光显微镜观察和RT-PCR验证该基因的表达.结果 PCR、双酶切和双向测序结果显示pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体构建成功,荧光显微镜和RT-PCR的结果显示该重组质粒在HONE1细胞中正确表达.结论 成功构建了pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体,并在鼻咽癌细胞HONE1中表达,为进一步验证其抑癌作用及探索其抑癌机制做准备.
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| 关 键 词： | 鼻咽癌 CYB5R2基因 真核表达载体 |
| 收稿时间： | 2011/5/10 0:00:00 |
Construction of human eukaryotic expression vector with CYB5R2 gene |
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| YU Na-n,DU Chun-ping,XIAO Xue,et al..Construction of human eukaryotic expression vector with CYB5R2 gene[J].Chinese Journal of New Clinical Medicine,2011,4(8):695-699. |
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| Authors: | YU Na-n DU Chun-ping XIAO Xue |
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| Institution: | Department of Otolaryngology-Head & Neck Surgery, First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, China |
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