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羌活和宽叶羌活简单重复序列区间扩增反应体系的正交优化
引用本文:古松,蒋舜媛,唐学芳,孙辉,杨志荣,孙群.羌活和宽叶羌活简单重复序列区间扩增反应体系的正交优化[J].时珍国医国药,2007,18(12):2892-2894.
作者姓名:古松  蒋舜媛  唐学芳  孙辉  杨志荣  孙群
作者单位:1. 四川大学生命科学学院,教育部生物资源与生态环境重点实验室,四川,成都,610065
2. 四川省中药研究所,四川成都,610041
3. 四川大学环境科学与工程系,四川成都,610065
基金项目:国家科技基础条件平台工作项目(2005DKA21004);国家“十五”攻关创新药物与中药现代化专项(2001BA701A60-3)
摘    要:目的通过探讨羌活和宽叶羌活ISSR实验中各种因素的影响,以建立羌活和宽叶羌活的简单重复序列区间扩增(ISSR-PCR)最佳反应体系。方法利用正交实验设计L9(34)对羌活和宽叶羌活ISSR-PCR反应体系的4因素(Mg2 ,dNTP,引物,Taq酶)在3个水平上进行优化实验,PCR结果用SPSS13.0统计软件分析,并设置梯度PCR进行引物退火温度筛选。结果在20μl ISSR-PCR反应体系中,各组分的最适浓度为:2.0 mmol/L Mg2 ,250μmol/L dNTPs,0.50μmol/L引物,1UTaq酶,40 ng DNA模板;模板DNA40~90 ng,不同引物有不同的最佳退火温度,范围在48~52℃。结论该优化体系的建立为进一步进行羌活和宽叶羌活种群间遗传多样性研究提供了参考。

关 键 词:羌活  宽叶羌活  简单重复序列区间扩增  正交实验设计
文章编号:1008-0805(2007)12-2892-03
收稿时间:2007-04-05
修稿时间:2007-06-16

Optimization for ISSR - PCR Reaction System in Notopterygium incisum Ting and N.forbesii Boiss Using Orthogonal Design
GU Song,JIANG Shun-yuan,TANG Xue-fang,SUN Hui,YANG Zhi-tong,SUN Qun.Optimization for ISSR - PCR Reaction System in Notopterygium incisum Ting and N.forbesii Boiss Using Orthogonal Design[J].Lishizhen Medicine and Materia Medica Research,2007,18(12):2892-2894.
Authors:GU Song  JIANG Shun-yuan  TANG Xue-fang  SUN Hui  YANG Zhi-tong  SUN Qun
Abstract:
Keywords:Notopterygium incisum  N  forbesii  ISSR-PCR  Orthogonal design
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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