miR-214负向调控结肠癌细胞株LoVo中Sema4D的表达

目的:观察miR-214对人结肠癌细胞株LoVo中轴突导向因子4D(semaphorin 4D,Sema4D)表达水平的影响,探讨miR-214对Sema4D的调控作用.方法:设计并合成miR-214模拟物(miR-214mimics),miR-214抑制剂(miR-214 inhibitor),二者对照序列(mi-control,in-control),分别与以脂质体lipofectamine 2000包裹后转染人结肠癌细胞株LoVo.RT-PCR检测转染24 h后各细胞株内miR-214的表达及Sema4D mRNA的表达变化,并用Western blot检测Sema4D蛋白的表达变化.结果:LoVo细胞株转染miR-214 mimics、mi-control,inhibitor、in-control 24 h后miR-214的相对表达量为8.003±0.651,3.464±0.332,0.740±0.088,2.620±0.166,mimics组miR-214表达较其对照组升高,inhibitor组表达较其对照组降低(P0.05).Sema4D mRNA的相对表达量为:0.420±0.027,0.851±0.062,1.243±0.087,0.660±0.042;Sema4D蛋白/β-actin分别为:0.163±0.037,0.550±0.038,1.137±0.112,0.457±0.046.Sema4D mRNA及蛋白mimics组表达较其对照组降低,inhibitor组较其对照组升高(P0.05).结论:人结肠癌细胞株LoVo中,Sema4D受miR-214的调控,miR-214可负向调控Sema4D mRNA的表达水平进而影响其蛋白的表达,miR-214可能作为结肠癌治疗的新靶点.