实时定量PCR检测46例初诊急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARαmRNA的分子表达 |
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引用本文: | 主鸿鹄,刘艳荣,秦亚溱,李金兰,常艳,王亚哲,单福香,江滨,陆道培.实时定量PCR检测46例初诊急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARαmRNA的分子表达[J].中国实验血液学杂志,2007,15(1):1-5. |
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作者姓名: | 主鸿鹄 刘艳荣 秦亚溱 李金兰 常艳 王亚哲 单福香 江滨 陆道培 |
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作者单位: | 1. 北京大学人民医院,北京大学血液病研究所,北京,100044 2. 北京市道培医院,北京,100049 3. 北京大学人民医院,北京大学血液病研究所,北京,100044;北京市道培医院,北京,100049 |
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摘 要: | 本研究探讨实时定量PCR(Q-PCR)检测PML/RARα mRNA的方法学,并对46例初诊急性早幼粒细胞白血病(APL)患者骨髓标本进行检测。构建PML/RARα的bcr1型和ber3型转录本以及内参照abl基因转录本的阳性标准品质粒;利用ABI Prism 7500型Q-PCR仪对46例初诊APL患者和40例非APL患者骨髓标本进行检测,PML/RARα mRNA定量结果以校正比值(NQ)表示,NQ=PML/RARα mRNA拷贝数/ABLmRNA拷贝数;应用四色流式细胞术检测免疫表型。结果显示,Q-PCR结果的日间差和日内差平均变异系数(CV)分别为1.58%和0.88%。可重复敏感度为可以检测5 copies/100ng RNA。40例非APL患者PML/RARα mRNA均为阴性。46例初诊APL患者PML/RARα mRNA表达量NQ中位值为0.450(0.084—1.082)。比较32例bcr1型和14例bcr3型两组患者的特征表明,PML/RARα mRNANQ中位值分别为0.454(0.084—1、082)和0.386(0.151—0.848)(P〉0.05)。形态学诊断M3v的患者比例分别为9.40%和48.96%(P〈0.05);初诊时WBC中位数分别为2.15(0.2—59.6)和9.35(0.91—122.8)(P〈0.05),而在性别、年龄、初诊时血红蛋白和血小板计数、骨髓中APL细胞比例、DIC指标等方面无差异。流式细胞仪术检测时,CD45/SSC射门情况下,APL细胞群分布可以分为两类:高侧向角(L-SSC,粗颗粒)和非高侧向角(NL-SSC,细颗粒)两类。bcr1型患者中85.70%表现为L—SSC,而bcr3型患者中64.29%表现为NL-SSC。结论:建立的Q—PCR方法稳定可靠,敏感度高;berl型和bcr3型APL患者的PML/RARetmRNA表达量无差异,bcr3型APL患者中形态学M3v比例和WBC数比bcr1型患者高;PML/RARα不同转录本类型和免疫表型以及细胞形态学之间有一定的相关性。
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关 键 词: | 白血病 急性早幼粒细胞白血病 实时定量PCR PML/RARα |
文章编号: | 1009-2137(2007)01-0001-05 |
收稿时间: | 2006-03-01 |
修稿时间: | 2006-11-02 |
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