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牛血清清蛋白在小鼠骨肉瘤模型PCR基因分型中的应用
引用本文:谷俊侠,乔龙威,梁玉婷,冉德园,吕耀娟,郑其平. 牛血清清蛋白在小鼠骨肉瘤模型PCR基因分型中的应用[J]. 临床检验杂志, 2013, 31(11): 844-847
作者姓名:谷俊侠  乔龙威  梁玉婷  冉德园  吕耀娟  郑其平
作者单位:江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013/Rush大学医学中心,美国芝加哥60612;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013/Rush大学医学中心,美国芝加哥60612
基金项目:国家自然科学基金(31271399)。
摘    要:摘要:目的:验证在PCR反应体系中加入牛血清清蛋白(BSA)可否提高小鼠骨肉瘤模型floxed Rb1基因杂合子和纯合子的检出率与准确率。 方法:以小鼠骨肉瘤模型子代小鼠基因组DNA为模板,进行Rb1基因的PCR基因分型。对在PCR反应体系中添加适量浓度(0.16 mg/mL)的BSA与不加BSA的PCR基因分型结果相比较。PCR引物序列涵盖Rb1基因外显子19两侧或3′端的LoxP序列。 结果:反应体系中添加BSA后,可成功获得PCR扩增条带:单一650 bp 或247 bp(野生型)、单一700 bp 或295 bp(floxed Rb1基因纯合型)以及650 bp和700 bp(或247 bp 和295 bp)混合条带(floxed Rb1基因杂合型),而反应体系中未加BSA的则无PCR扩增条带产生。 结论:BSA可显著提高floxed Rb1基因的扩增效率,增加了该基因杂合子和纯合子的检出率并排除了假阴性结果,对于难以扩增的靶基因序列的PCR基因分型具有借鉴意义。

关 键 词:小鼠骨肉瘤;Rb1基因;PCR基因分型;牛血清清蛋白
收稿时间:2013-09-25

Application of bovine serum albumin in the PCR genotyping of osteosarcoma mouse models
Abstract:
Keywords:mouse osteosarcoma   Rb1 gene   PCR genotyping   bovine serum albumin
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