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IL-18基因的克隆及其在宫颈癌细胞中的表达研究
引用本文:包珊,杨舒盈,符生苗,姚书忠. IL-18基因的克隆及其在宫颈癌细胞中的表达研究[J]. 中国热带医学, 2003, 3(5): 571-573
作者姓名:包珊  杨舒盈  符生苗  姚书忠
作者单位:1. 海南省人民医院,海口市,570311
2. 中山大学附一医院妇产科
摘    要:目的:研究白细胞介素18(Interleukin-18,IL18)基因能否在宫颈癌细胞(Hela细胞)中表达。方法:从人胎脑RNA中RT-PCR扩增IL-18基因,构建真核基因表达载体pcDNA3.1( )-IL18,并转染到宫颈癌细胞中,收集细胞转染后24-48h上清,Western-Blotting检测IL18基因在宫颈癌细胞中的短暂表达。G418筛选稳定表达IL18基因的单克隆宫颈癌细胞,利用RT-PCR、Western—Blotting检测IL18基因在宫颈癌细胞中的稳定表达。研究为三组:1.空白Hela细胞组;2.空载体pcDNA3.1( )转染Hela细胞组;3.pcDNA3.1( )-IL18传染Hela细胞组。结果:1.成功克隆IL18基因。2.成功构建真核基因表达载体pcDNA3.1( )-IL18。3.短暂表达结果:Western—Blotting检测pcDNA3.1( )-IL18组在14.4至20.1KDa之间有一特异性条带(18.3KDa),空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1( )组均没有任何条带。4.稳定表达检测结果:(1)RT—PCR结果:pcDNA3.1( )-IL18组扩增到一特异性DNA条带,位于750至1000bp之间,空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1( )组均没有扩增到任何条带。(2)Western-Blotting结果:pcDNA3.1( )-IL18组在14.4至20.1KD之间有一特异性条带(18.3KDa),空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1( )组均没有任何条带。结论:1.成功克隆ILl8基因并构建真核基因表达载体pcDNA3.1( )-IL18。2.IL18基因成功导入到宫颈癌细胞Hela细胞中,并且有表达。

关 键 词:IL-18 基因克隆 宫颈癌 表达 癌细胞
文章编号:1009-9727(2003)05-0571-03
修稿时间:2003-04-24

Cloning of IL - 18 gene and research on the expression of IL - 18 gene in cervical cancer Cell
BAO San,YANG Shu-ying,FU Sheng-miao,et al.. Cloning of IL - 18 gene and research on the expression of IL - 18 gene in cervical cancer Cell[J]. China Tropical Medicine, 2003, 3(5): 571-573
Authors:BAO San  YANG Shu-ying  FU Sheng-miao  et al.
Affiliation:BAO San,YANG Shu-ying,FU Sheng-miao,et al.Department of Obstetrics and Gynecology of Hainan Provincial People's Hospital,Haikou 570311,Hainan,P.R.China
Abstract:
Keywords:Interleukin-18 Cervical cancer  Gene clone  Gene expression  Gene therapy
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