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AEG1促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β的实验研究
引用本文:邓欢,周珍珍,黄焕军,刘静梅,刘吉巧,兰小勤,田德安.AEG1促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β的实验研究[J].胃肠病学和肝病学杂志,2013,22(7):620-623.
作者姓名:邓欢  周珍珍  黄焕军  刘静梅  刘吉巧  兰小勤  田德安
作者单位:邓欢 (华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,湖北武汉,430030); 周珍珍 (华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,湖北武汉,430030); 黄焕军 (华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,湖北武汉,430030); 刘静梅 (华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,湖北武汉,430030); 刘吉巧 (华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,湖北武汉,430030); 兰小勤 (华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,湖北武汉,430030); 田德安 (华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,湖北武汉,430030);
基金项目:国家自然科学基金资助项目(项目编号:81070333),湖北省自然科学基金(项目编号:2012FFB02318)
摘    要:目的研究AEG1能否促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β,探讨AEG1是否参与改变肿瘤微环境。方法用脂质体稳定转染法分别转染pcDNA3.1(-)-AEG1(AEG1全长质粒)、psilencer 2.0-shAEG1(AEG1干扰质粒)至HepG2细胞,相对应以转染空质粒pcDNA3.1(-)、psilencer 2.0的HepG2细胞为对照组;采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)、Western blotting检测AEG1 mRNA和蛋白表达变化;采用实时荧光定量RT-PCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子IL-6、IL-1β的表达和分泌。结果与转染相应空载体的阴性对照组和未转染的空白对照组相比,分别转染AEG1全长质粒/AEG1干扰质粒后,HepG2细胞中AEG1的蛋白表达明显增高/降低。转染AEG1全长质粒的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组明显增强(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也显著高于对照组(P均<0.05);转染AEG1 shRNA的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组降低(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也低于对照组(P均<0.05)。结论成功构建稳定过表达和沉默AEG1的HepG2细胞,AEG1能调控IL-6、IL-1β的表达和分泌。

关 键 词:肝细胞癌  HepG2  AEG1  IL-6  IL-1β
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