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臭牡丹含药血清通过PI3K/Akt信号通路对肝癌细胞的影响
引用本文:胡琦,朱定耀,谭小宁,朱克俭. 臭牡丹含药血清通过PI3K/Akt信号通路对肝癌细胞的影响[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019, 25(22): 28-33
作者姓名:胡琦  朱定耀  谭小宁  朱克俭
作者单位:湖南中医药大学, 长沙 410208,湖南中医药大学, 长沙 410208,湖南省中医药研究院 附属医院, 长沙 410006,湖南省中医药研究院 附属医院, 长沙 410006
基金项目:国家中医药管理重大项目(国中医药人教函[2012]228号);湖南中医药大学校级科研项目(2017XJJJ21)
摘    要:目的:从磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路角度探讨臭牡丹含药血清对肝癌MHCC97-H细胞的影响及可能的机制。方法:臭牡丹15%含药血清作用于MHCC97-H细胞,细胞增殖/毒性法(CCK-8)观察臭牡丹含药血清对细胞增殖的影响,以筛选最佳作用时间和浓度; Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测臭牡丹含药血清作用于细胞72 h后对PI3K/Akt信号通路中关键蛋白中第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN),磷酸化Akt(p-Akt)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)蛋白表达的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测臭牡丹含药血清作用于细胞72 h后对核转录因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的影响。结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,臭牡丹含药血清对肿瘤细胞的增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性。其中高剂量组抑制作用最为明显,在24,48,72 h的最大抑制率分别达到28%,32%,43%;流式细胞术结果显示,与空白组比较,随着臭牡丹含药血清浓度的增加,细胞的生长均受不同程度抑制,细胞的凋亡比例亦相应增加,72 h干预组抑制作用显著(P 0. 01),臭牡丹含药血清组各时间段最大凋亡率达19. 48%,19. 72%(P 0. 05); Western blot结果显示,与空白组比较,臭牡丹含药血清干预下各组PTEN表达量均升高(P 0. 05),PI3K,p-Akt蛋白表达均减少(P 0. 05); Real-time PCR结果显示,与空白组比较,臭牡丹含药血清可以下调NF-κB mRNA表达,上调TNF-αmRNA的表达(P 0. 05)。结论:臭牡丹含药血清可以有效抑制MHCC97-H肝癌细胞增殖并促进其凋亡,可能与PI3K/Akt信号通路并影响其关键因子有关。

关 键 词:臭牡丹  肝癌细胞MHCC97-H  磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)  含药血清
收稿时间:2018-11-09

Effect of Drug-containing Serum of Clerodendrum bungei on Liver Cancer Cells Through PI3K/Akt Signaling Pathway
HU Qi,ZHU Ding-yao,TAN Xiao-ning and ZHU Ke-jian. Effect of Drug-containing Serum of Clerodendrum bungei on Liver Cancer Cells Through PI3K/Akt Signaling Pathway[J]. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2019, 25(22): 28-33
Authors:HU Qi  ZHU Ding-yao  TAN Xiao-ning  ZHU Ke-jian
Affiliation:Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China,Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China,Hunan Academy of Chinese Medicine Affiliated Hospital, Changsha 410006, China and Hunan Academy of Chinese Medicine Affiliated Hospital, Changsha 410006, China
Abstract:
Keywords:Clerodendron bungei  liver cancer cell MHCC97-H  phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K)/protein kinase (Akt) signaling pathway  drug-containing serum
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