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越鞠丸合甘麦大枣汤加减对谷氨酸诱导的HT22细胞损伤模型的神经保护作用
引用本文:葛渴敏,王薇,薛文达,陈刚,王福顺. 越鞠丸合甘麦大枣汤加减对谷氨酸诱导的HT22细胞损伤模型的神经保护作用[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019, 25(12): 22-27
作者姓名:葛渴敏  王薇  薛文达  陈刚  王福顺
作者单位:南京中医药大学 医学与生命科学学院, 医学心理学院, 基础医学院, 南京 210023,南京中医药大学 医学与生命科学学院, 医学心理学院, 基础医学院, 南京 210023,南京中医药大学 医学与生命科学学院, 医学心理学院, 基础医学院, 南京 210023,南京中医药大学 医学与生命科学学院, 医学心理学院, 基础医学院, 南京 210023,南京中医药大学 医学与生命科学学院, 医学心理学院, 基础医学院, 南京 210023
基金项目:国家自然科学基金项目(81603497);江苏省自然科学基金项目(BK20151565)
摘    要:目的:探讨越鞠丸合甘麦大枣汤加减(YJGZ)对谷氨酸诱导的小鼠海马神经元细胞系(HT22)细胞损伤的神经保护作用。方法:HT22细胞系无菌培养,以高浓度谷氨酸建立细胞损伤模型,并制备YJGZ水提液和含药血清,分为正常组,模型组,YJGZ含药血清组(1%,5%,10%),YJGZ水提液组(166 mg·L~(-1)),尼莫地平组(100μmol·L~(-1))。噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞存活率;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率及细胞内活性氧自由基(ROS)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位2B蛋白(NR2B),环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB),磷酸化CREB(p-CREB),细胞外调节蛋白激酶(ERK),磷酸化ERK(p-ERK)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组细胞存活率显著下降(P 0. 01),乳酸脱氢酶(LDH)释放率明显增加(P 0. 05),细胞内活性氧(ROS)水平明显增加(P 0. 05),NR2B蛋白的表达明显升高(P 0. 05),CREB,p-CREB,ERK,p-ERK蛋白表达水平明显降低(P 0. 05);与模型组比较,YJGZ水提液组和尼莫地平组均能显著提高谷氨酸模型条件下HT22细胞的存活率(P 0. 01),减少细胞损伤,减少LDH的释放率,降低细胞内ROS水平(P 0. 05,P 0. 01),降低NR2B蛋白的表达水平(P 0. 05),增加CREB,p-CREB,ERK,p-ERK蛋白的表达(P 0. 05); YJGZ含药血清组与模型组比较,HT22细胞存活率并没有提高。结论:YJGZ水提液对谷氨酸诱导的HT22细胞损伤具有显著的保护作用。

关 键 词:越鞠丸  甘麦大枣汤  海马神经元细胞系(HT22)  谷氨酸  神经保护
收稿时间:2018-10-23

Neuroprotective Effect of Modified Yuejuwan and Ganmai Dazao Tang on Glutamate-induced HT22 Cell Injury Model
GE Ke-min,WANG Wei,XUE Wen-d,CHEN Gang and WANG Fu-shun. Neuroprotective Effect of Modified Yuejuwan and Ganmai Dazao Tang on Glutamate-induced HT22 Cell Injury Model[J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2019, 25(12): 22-27
Authors:GE Ke-min  WANG Wei  XUE Wen-d  CHEN Gang  WANG Fu-shun
Affiliation:School of Medicine and Life Sciences, School of Psychology, School of Basic Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China,School of Medicine and Life Sciences, School of Psychology, School of Basic Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China,School of Medicine and Life Sciences, School of Psychology, School of Basic Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China,School of Medicine and Life Sciences, School of Psychology, School of Basic Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China and School of Medicine and Life Sciences, School of Psychology, School of Basic Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China
Abstract:
Keywords:Yuejuwan  Ganmai Dazao Tang  hippocampal neuron cell line (HT22)  glutamate  neuroprotection
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