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芦荟苦素对非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响
引用本文:朱杨壮壮,张飞,焦肖宁,苏琳,韦璐瑶,朱娴丹,黄珍祯,朱诗国,陈晓,邹纯朴,胥孜杭. 芦荟苦素对非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019, 25(14): 13-18
作者姓名:朱杨壮壮  张飞  焦肖宁  苏琳  韦璐瑶  朱娴丹  黄珍祯  朱诗国  陈晓  邹纯朴  胥孜杭
作者单位:上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海交通大学 医学院 附属新华医院, 上海 200092,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203,上海中医药大学 基础医学院, 经方理论应用研究中心, 科技实验中心, 上海 201203
基金项目:国家自然科学基金青年基金项目(81804017);中国博士后基金面上项目(2018M640416);上海市科学技术委员会科研计划项目(18YF1423500);经方理论应用研究中心项目(A1-Z183020110)
摘    要:目的:研究芦荟苦素诱导人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) A549细胞发生凋亡,从而抑制其增殖的作用机制。方法:取对数生长期的A549细胞,用细胞计数试剂(cell counting kit,CCK-8)检测考察不同浓度的芦荟苦素(0,2,4,8,16,32,64,128μmol·L~(-1))对A549细胞增殖的影响,5μmol·L~(-1)的顺铂作为阳性对照。用结晶紫染色测定芦荟苦素(0,16μmol·L~(-1))对A549细胞克隆形成的数目以及克隆形成的大小的作用;磷脂酰丝氨酸结合蛋白V/碘化丙啶(annexin V/propidium iodide,PI)凋亡试剂盒染色检测芦荟苦素对A549细胞凋亡的影响;赫斯特(Hoechst)染色检测细胞凋亡核固缩现象;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测芦荟苦素对A549细胞中的B细胞淋巴瘤-特大型蛋白(B-cell lymphoma-extra large,Bclxl),B细胞淋巴瘤-特大型/B细胞淋巴瘤-2联合死亡促体(Bcl-xl/Bcl-2 associated death promoter,Bad),裂解半胱天冬酶-3[cleaved-Caspase3,cl-Caspase-3(Asp175)],半胱天冬酶-3(Caspase-3),裂解核糖聚合酶(cleaved-poly ADP-ribose polymerase,clPARP),核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)凋亡相关蛋白表达的影响。体内实验将5周龄裸鼠皮下接种2×106个A549细胞,并随机分为用药组和空白组,连续4周每天分别进行芦荟苦素或生理盐水腹腔注射,每周测量裸鼠肿瘤体积和小鼠体质量,并观察裸鼠的外观表现(精神、毛发、食欲、睡眠等)。结果:芦荟苦素呈浓度依赖性抑制A549细胞增殖及克隆形成的数量和大小(P 0. 05)。经芦荟苦素处理后,A549细胞凋亡的数量以及细胞发生核固缩的现象明显增加(P 0. 01),同时,芦荟苦素还明显下调了凋亡相关蛋白Bcl-xl的表达(P 0. 05),增加Bad蛋白表达(P 0. 01),同时还明显升高了cl-PARP(P 0. 01)和cl-Caspase-3(P 0. 05)表达水平。此外,在体内,芦荟苦素可明显缩小小鼠皮下肿瘤的体积,减轻肿瘤质量,并且小鼠外观表现优于空白组。结论:芦荟苦素可能通过诱导A549细胞凋亡从而达到抑制NSCLC的作用,并且用药安全。

关 键 词:芦荟苦素  非小细胞肺癌  抑制细胞增殖  细胞凋亡
收稿时间:2019-03-07

Effect of Aloesin on Proliferation and Apoptosis of Non-small Cell Lung Cancer A549 Cells
ZHU Yang-zhuang-zhuang,ZHANG Fei,JIAO Xiao-ning,SU Lin,WEI Lu-yao,ZHU Xian-dan,HUANG Zhen-zhen,ZHU Shi-guo,CHEN Xiao,ZOU Chun-pu and XU Zi-hang. Effect of Aloesin on Proliferation and Apoptosis of Non-small Cell Lung Cancer A549 Cells[J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2019, 25(14): 13-18
Authors:ZHU Yang-zhuang-zhuang  ZHANG Fei  JIAO Xiao-ning  SU Lin  WEI Lu-yao  ZHU Xian-dan  HUANG Zhen-zhen  ZHU Shi-guo  CHEN Xiao  ZOU Chun-pu  XU Zi-hang
Abstract:
Keywords:aloesin  non-small cell lung cancer  inhibition of cell proliferation  apoptosis
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