帕金森病免疫介导黑质损伤的动物实验研究 |
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引用本文: | 侯晓妹,孙圣刚,童萼塘,姚源蓉. 帕金森病免疫介导黑质损伤的动物实验研究[J]. 中华神经科杂志, 2004, 37(2): 131-134 |
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作者姓名: | 侯晓妹 孙圣刚 童萼塘 姚源蓉 |
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作者单位: | 430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 170 3 3 4) |
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摘 要: | 目的研究帕金森病(PD)患者血清中抗大鼠黑质部膜蛋白IgG抗体的提取方法以及抗体的特异性免疫损伤作用.方法差速离心法粗提SD大鼠黑质质膜,并将其偶联至溴化氢活化的琼脂糖4B(CNBr-activitied-sepharose 4B)上,将20例临床确诊的PD患者血清上样,收集洗脱峰,将洗脱产物通过蛋白A亲和层析柱,收集洗脱峰,间接酶联免疫吸附实验(ELISA)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分别检测其抗原结合活性和纯度.24只雄性SD大鼠随机分为3组,每组8只PBS组(注射PBS),健康组(注射健康人IgG),PD IgG组(注射PD IgG),对大鼠一侧黑质致密部(SNpc)进行立体定向注射,免疫组化检测酪氨酸羟化酶(TH)阳性的细胞数.结果层析后的洗脱产物为两条清晰的条带,相对分子质量分别为25 000,50 000,这与IgG轻链和重链相对分子质量的理论值相符合,证明其具有抗原结合活性并达到电泳纯.注射4周后,免疫组化显示PD IgG组注射侧的TH阳性细胞数比非注射侧下降了51%,而健康IgG组仅下降了4%,PBS组未见明显改变.统计学分析注射物对黑质的损伤作用显示,PD IgG组与健康IgG组相比差异有显著意义(P<0.05),PD IgG组与PBS组相比差异也有显著意义(P<0.05).结论用免疫亲和层析法可获得PD血清中抗大鼠黑质部膜蛋白的IgG抗体成分,其对黑质多巴胺能神经元具有免疫损伤作用.
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关 键 词: | 帕金森病 PD 免疫介导 黑质损伤 动物实验 免疫损伤 免疫球蛋白G |
修稿时间: | 2003-01-17 |
Experiment on destruction of substantia nigra initiated by immune mechanisms in Parkinson disease |
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Abstract: | |
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Keywords: | Parkinson disease Chromatography affinity Membrane proteins Immunoglobulin G |
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