| 人颗粒蛋白前体F片段结构域单克隆抗体的制备与鉴定北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 李彦青任东妮夏海滨.人颗粒蛋白前体F片段结构域单克隆抗体的制备与鉴定北大核心CSCD[J].细胞与分子免疫学杂志,2015(4):540-543. |
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| 作者姓名： | 李彦青任东妮夏海滨 |
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| 作者单位： | 1.陕西师范大学生命科学学院秦巴山区可持续发展协同创新中心710119; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81272543；81301957；81471772)；陕西省自然科学基金重点项目(2014JZ005)；中央高校基金项目(GK201301010) |
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| 摘 要： | 目的制备抗人颗粒蛋白前体F片段(GrnF)的单克隆抗体(mAb),并初步鉴定其生物学特性。方法通过分子生物学技术构建含人GrnF编码序列的酵母表达载体,表达并纯化酵母来源的融合人血清白蛋白(HSA)的GrnF片段HSA-GrnF。用纯化的HSA-GrnF免疫BALB/c小鼠,然后将免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0进行融合,用ELISA筛选阳性克隆,并采用有限稀释法进行亚克隆;采用免疫荧光染色及Westernblot法对所获得的mAb的特异性进行鉴定,并用抗体亚类测定试剂盒检测所获得单克隆抗体亚类。结果成功获得2株可分泌特异性抗GrnF的杂交瘤细胞株(1G6及4E8),经鉴定这2株抗体重链亚类均为IgG1亚类。结论成功制备了抗人GrnF片段结构域的单克隆抗体。
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| 关 键 词： | 颗粒前体蛋白 Grn F 酵母表达载体 杂交瘤 单克隆抗体 |
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