| RNAi沉默DNMT1基因对胰腺癌细胞ppENK甲基化状态的影响 |
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| 引用本文： | 卜淑蕊,钱家鸣. RNAi沉默DNMT1基因对胰腺癌细胞ppENK甲基化状态的影响[J]. 临床与实验病理学杂志, 2013, 29(1): 28-31 |
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| 作者姓名： | 卜淑蕊 钱家鸣 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院,北京协和医学院,北京协和医院消化内科 |
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| 基金项目： | 博士后科学基金(2005038378) |
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| 摘 要： | 目的观察RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默DNMT1基因的表达对胰腺癌Panc-1细胞的前脑啡肽原(preproen-kephalin,ppENK)基因甲基化状态的影响。方法采用针对DNMT1的Stealth核糖核苷酸干扰(siRNA)胰腺癌细胞,观察DN-MT1信使核糖核酸(mRNA)及DNMT1蛋白的表达;甲基化特异性PCR反应(MSP)检测不同处理组ppENK的甲基化状态。结果 Stealth RNAi转染到胰腺癌细胞Panc-1中48 h后,siRNA-3转染组的mRNA相对表达量和比率分别为0.116和32.9%,与空白对照组(0.352,100%)、脂质体对照组(0.346,98.2%)、RNAi阴性对照组(0.339,96.3%)相比差异有统计学意义(F=2.107 E4,P=0.000 1),转染组的mRNA相对抑制率为67.1%。siRNA-3转染组DNMT1蛋白相对表达量和比率分别为0.179和32.9%,与空白对照组(0.547,100%)、脂质体对照组(0.520,95%)、RNAi阴性对照组(0.535,97%)相比差异有统计学意义(F=2.195 E5,P=0.000 1)。于100 bp和96 bp处可见ppENK基因特异性条带,呈现部分去甲基化状态的特点。结论 DNMT1靶向的Stealth RNA瞬时转染到胰腺癌细胞Panc-1中可明显沉默DNMT1的基因和蛋白的表达,逆转抑癌基因ppENK的高甲基化状态,为胰腺癌的基因治疗提供相关的理论依据。
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| 关 键 词： | 胰腺肿瘤 RNA干扰 甲基化转移酶1 前脑啡肽原 甲基化 |
Effects of RNAi-mediated inhibitor of DNMT1 gene silencing on ppENK methylation in the pancreatic cancer cell line |
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| BU Shu-rui,QIAN Jia-ming. Effects of RNAi-mediated inhibitor of DNMT1 gene silencing on ppENK methylation in the pancreatic cancer cell line[J]. Chinese Journal of Clinical and Experimental Pathology, 2013, 29(1): 28-31 |
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| Authors: | BU Shu-rui QIAN Jia-ming |
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| Affiliation: | (Department of Gasteroenterology,Chinese Academy of Medical Sciences & Beijing Union Medical College,Peking Union Medical College Hospital,Beijing 100730,China) |
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