中成药坤宁安调控围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2mRNA表达的特点

目的：观察中成药坤宁安对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。 方法：实验于2004年在黑龙江中医药大学完成。选用13—15个月龄雌性Wistaer大鼠50只。经阴道脱落细胞涂片检查，呈现出无动情周期确定为围绝经期鼠。随机分为5组。围绝经期模型组、坤宁安高剂量组，坤宁安低剂量组、替勃龙对照组、更年康对照组，每组10只。另选5月龄雌性Wistar大鼠10只作为青年对照组。围绝经期模型组给予生理盐水2mL，坤宁安高剂量组给予1．96g／kg坤宁安混悬液（组成为柴胡，桂枝、龙骨、牡蛎、白芍、当归等）；坤宁安低剂量组给予0．49g／kg坤宁安混悬液；替勃龙对照组给予0．136mg／kg替勃龙混悬液；更年康对照组给予0．15g／kg更年康混悬液；青年对照组给予生理盐水2mL，灌胃1次／d。灌胃4周后，断头处死，剖取大鼠卵巢，即供原位杂交法检测Bcl-2mRNA的表达。卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2mRNA阳性评定标准：根据切片卵巢组织中卵泡内颗粒细胞免疫组织化学染色的深浅分4级，未被染色的为阴性表达．深棕色为弱阳性表达，棕黄色为中度阳性表达，棕褐色为强阳性表达。为统计方便．予以半定量计分：1，2．3，4分别对应阴性表达，弱阳性表达，中度阳性表达，强阳性表达。每张切片至少观察3个视野。 结果：实验过程中，围绝经期模型组、更年康对照组各有1只大鼠死亡。其余大鼠均存活直至实验结束。青年对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈强阳性表达，围绝经期模型组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈弱阳性表达．青年对照组与之相比差异有极显著性意义（P〈0．01）。坤宁安高、低剂量组、替勃龙对照组大鼠卵巢颗粒细胞均有不同程度的Bcl-2 mRNA阳性表达，与围绝经期模型组大鼠比较差异均有极显著性意义（P〈0．01），更年康对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA蛋白表达里弱阳性，与围绝经期模型组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。 结论：围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡与Bcl-2mRNA的阳性表达呈负相关，坤宁安通过调控大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA的表达．达到延缓卵巢颗粒细胞凋亡的目的。

Effect of kun ning an on regulation of apoptotic factor Bcl-2 mRNA expression in ovary granule cells of peri-menopause rats