多重二次PCR在微量DNA标本检验中的应用 |
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引用本文: | 张海添,陆云飞,李卫,曾健,廖清华,林伟雄,陈剑锋,金琪.多重二次PCR在微量DNA标本检验中的应用[J].广西医科大学学报,2002,19(6):799-800. |
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作者姓名: | 张海添 陆云飞 李卫 曾健 廖清华 林伟雄 陈剑锋 金琪 |
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作者单位: | 1. 广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021 2. 广西医科大学第一附属医院儿科实验室,南宁,530021 |
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基金项目: | 广西自然科学基金资助 (No:桂科自 0 0 0 70 2 9) |
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摘 要: | 目的:探讨用多重二次PCR扩增极微量DNA标本供后续SSCP和DNA测序分析。方法:对照组取微量组织提取的DNA为模板,分别用不同的4对引物各自行PCR,同一PCR反应体系里加入4对引物扩增。然后将此扩增产物稀释1000倍为模板,再以相同引物进行第二次PCR。实验组:取微量组织提取的DNA为模板,以与对照组相同的4对引物各自进行PCR。用琼脂糖凝胶电泳检测PCR结果,用DNA测序方法检验二次PCR扩增产物的特异性。结果:微量的DNA标本可同时被多对引物二次扩增。实验组与对照组比较,各自引物扩增的DNA片段在琼脂糖凝胶电泳显示区带速率相同,测序显示碱基序列相同。结论:因极微量的DNA模板不能满足多引物多次PCR时,可用多重二次PCR扩增,本方法在法医学、考古和组织活检等方面将有广阔的用途。
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关 键 词: | 多重PCR 二次PCR DNA测序 |
修稿时间: | 2002年7月10日 |
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