大容量人源Fab噬菌体展示抗体库的构建及抗CD276抗体筛选 |
| |
引用本文: | 刘婕,陈俊亨,徐天殊,王丽萍,赵琦.大容量人源Fab噬菌体展示抗体库的构建及抗CD276抗体筛选[J].中国医药生物技术,2014,9(4):273-277. |
| |
作者姓名: | 刘婕 陈俊亨 徐天殊 王丽萍 赵琦 |
| |
作者单位: | 中国科学院深圳先进技术研究院抗体药物研究中心;吉林大学生命科学学院 |
| |
基金项目: | 诺和诺德-中科院专项研究经费(NNCAS-2013-9) |
| |
摘 要: | 目的构建大容量人源Fab噬菌体库,筛选并鉴定抗CD276的特异性抗体。方法通过采集10位健康成人的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR扩增人Fab抗体基因片段,插入噬菌体载体pCANTAB5H中,构建人源Fab噬菌体抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后,随机挑取96个单克隆进行phage-ELISA鉴定,筛选出与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。结果成功构建库容为5×1010的噬菌体抗体库,从中筛选到11株阳性克隆,对其进行测序鉴定,表明该11株克隆的序列均一致,ELISA证实其对抗原CD276具有较强的结合性。结论构建了大容量人源Fab抗体库,从中获得具有抗CD276的人源Fab抗体片段,为进一步的研究和应用提供实验基础。
|
关 键 词: | 免疫球蛋白Fab片段 噬菌体展示抗体库 CD276 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
| 点击此处可从《中国医药生物技术》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国医药生物技术》下载免费的PDF全文 |
|