达托利司抑制替莫唑胺耐药恶性胶质瘤细胞增殖的机制研究

目的探讨达托利司（DAC）抑制替莫唑胺（TMZ）耐药恶性胶质瘤细胞增殖的机制。方法采用浓度梯度递增法构建TMZ耐药U251细胞（U251R细胞），并分为DAC组、DAC干预的表皮生长因子受体（EGFR）低表达组（KD组）、DAC干预的EGFR过表达组（OE组）和对照组。采用钙黄绿素和碘化丙啶双染色法、赫斯特染色法检测细胞死亡比例和凋亡比例。采用Westernblot法检测EGFR、B细胞淋巴瘤（Bcl-2）、切割半胱氨酸蛋白酶3（Cleaved-Caspase3）蛋白表达水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测EGFRmRNA相对表达水平。结果DAC组和KD组细胞死亡比例、细胞凋亡比例、Cleaved-Caspase3蛋白表达水平均高于对照组，EGFR、Bcl-2蛋白表达水平均低于对照组，OE组细胞死亡比例、细胞凋亡比例、Cleaved-Caspase3蛋白表达水平均低于DAC组，EGFR、Bcl-2蛋白表达水平均高于DAC组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。DAC组和KD组EGFRmRNA相对表达水平均低于对照组，OE组EGFRmRNA相对表达水平均高于DAC组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论DAC能通过下调EGFR抑制TMZ耐药恶性胶质瘤细胞增殖。