| AR-3可增强内含肽介导的全长凝血因子Ⅷ的基因表达 |
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| 引用本文： | 朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳.AR-3可增强内含肽介导的全长凝血因子Ⅷ的基因表达[J].中华医学杂志,2010,90(48). |
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| 作者姓名： | 朱甫祥 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 |
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| 作者单位： | 鲁东大学生命科学学院生物医学研究所,山东烟台,264025 |
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| 基金项目： | 山东省自然科学基金,烟台市科技发展计划 |
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| 摘 要： | 目的 观察具有促进凝血因子Ⅷ(fⅧ)重链分泌的酸性区3(AR-3)对蛋白质剪接作用连接的全长fⅧ分泌的影响.方法 以双载体转融合内含肽的全长fⅧ重链和轻链基因,并将AR-3融合于重链基因,瞬时共转培养的293细胞,用Western印迹观察转基因细胞内的蛋白质剪接;用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Coatest法定量分析分泌至培养上清中的剪接的全长fⅧ蛋白和由其产生的生物活性.结果 共转基因细胞内可见明显的剪接fⅧ蛋白形成,培养上清中剪接的fⅧ蛋白量和活性分别为(1 12±18)ng/ml和(0.76±0.13)U/ml,明显高于共转未融合AR-3的重链与轻链基因细胞(64±11)ng/ml和(0.37±0.05)U/ml],而且,混合培养的分别单独转AR-3融合重链和轻链基因细胞的上清中亦检测到剪接的fⅧ蛋白及活性(27±7)ng/ml和(0.16±0.05)U/ml].结论 AR-3可通过改善内含肽剪接的全长fⅧ的分泌增强转fⅧ基因的效果.
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| 关 键 词： | 因子Ⅷ 蛋白质剪接 转基因 酸性区3 |
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