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幽门螺杆菌尿素酶A基因的克隆、表达及其抗原性的鉴定
引用本文:李妍,宁云山,龙敏,董文其,李明. 幽门螺杆菌尿素酶A基因的克隆、表达及其抗原性的鉴定[J]. 热带医学杂志, 2006, 6(4): 355-358
作者姓名:李妍  宁云山  龙敏  董文其  李明
作者单位:南方医科大学生物技术学院,广州,510515;南方医科大学生物技术学院,广州,510515;南方医科大学生物技术学院,广州,510515;南方医科大学生物技术学院,广州,510515;南方医科大学生物技术学院,广州,510515
基金项目:国家重大攻关项目(No.2001CB510208)。
摘    要:目的构建幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)标准株NCTC11639尿素酶A(UreaseA,UreA)编码基因的重组质粒,测定、分析其核酸序列,并在E.coli中表达,研究其抗原性。方法应用PCR技术从HpDNA染色体中扩增UreA编码基因片段,将其克隆至pMD18-T载体上进行序列测定,并与GenBank上公布的其它Hp菌株基因序列进行比较,再将目的基因克隆至表达载体pGEX-4T-1上进行表达和纯化,用Western-blot检测产物的抗原性并用于对24株抗Hp全菌小鼠单克隆抗体的鉴定。结果扩增的UreA基因全长675bp(登录号为DQ141577),与GenBank上公布的其它Hp菌株的UreA核酸序列的同源性为95%~98%,表达的UreA融合蛋白分子量为52000,表达产物可被病人血清和全菌免疫的小鼠血清识别,29株抗Hp小鼠单克隆抗体中有4株是针对UreA抗原的。结论重组UreA具有较好的抗原性,为Hp检测试剂和疫苗的研究奠定基础。

关 键 词:幽门螺杆菌  尿素酶A  克隆  基因表达  抗原性
文章编号:1672-3619(2006)04-0355-04
收稿时间:2005-11-08
修稿时间:2005-12-27

Cloning, Expression and Antigenicity of UreaseA of Helicobacter pylori
LI Yan,NING Yun-shan,LONG Min,DONG Wen-qi,LI Ming. Cloning, Expression and Antigenicity of UreaseA of Helicobacter pylori[J]. Journal Of Tropical Medicine, 2006, 6(4): 355-358
Authors:LI Yan  NING Yun-shan  LONG Min  DONG Wen-qi  LI Ming
Abstract:
Keywords:Helicobacter pylori  UreA  cloning  gene expression  antigenicity  
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