| 稳定表达人GM-CSF和IL-4 EA.hy926细胞株建立及对DC诱导作用 |
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| 引用本文： | 杨晓琮,贺敏,王璇琳,李伟静,于群,葛银林. 稳定表达人GM-CSF和IL-4 EA.hy926细胞株建立及对DC诱导作用[J]. 青岛大学医学院学报, 2012, 48(4): 283-286 |
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| 作者姓名： | 杨晓琮 贺敏 王璇琳 李伟静 于群 葛银林 |
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| 作者单位： | 1. 青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室,山东青岛,266021
2. 军事医学科学院野战输血研究所 |
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| 基金项目： | 国家传染病重大专项，国家科技重大专项新药创制课题 |
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| 摘 要： | 目的获得分别能稳定表达人白细胞介素4(IL-4)和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的内皮细胞株,并用于树突状细胞(DC)的体外诱导培养。方法构建重组的慢病毒表达载体,在293T细胞中进行慢病毒的包装,用获得的高滴度的慢病毒感染内皮细胞EA.hy926细胞株,建立能够高效、稳定表达IL-4和GM-CSF的EA.hy926细胞株。结果 EA.hy926细胞株感染效率达90%以上,长期传代仍能保持较高阳性率。RT-PCR在mRNA水平上检测目的基因有表达;ELISA和Western方法证实感染后细胞IL-4、GM-CSF在蛋白水平的表达分别是未感染细胞的80倍和143倍。感染后细胞的生长状态良好,能够长期在体外进行传代培养,可以用于DC诱导实验。结论构建的细胞系可以稳定表达细胞因子IL-4和GM-CSF。
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| 关 键 词： | 树突细胞 转染 白细胞介素4 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 |
CONSTRUCTION OF TWO EA.hy926 CELL LINES TO EXPRESS GM-CSF AND IL-4 AND THEIR INDUCTION EFFECT ON DC |
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| YANG Xiaocong , HE Min , WANG Xuanlin , LI Weijing , YU Qun , GE Yinlin. CONSTRUCTION OF TWO EA.hy926 CELL LINES TO EXPRESS GM-CSF AND IL-4 AND THEIR INDUCTION EFFECT ON DC[J]. Acta Academiae Medicinae Qingdao Universitatis, 2012, 48(4): 283-286 |
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| Authors: | YANG Xiaocong HE Min WANG Xuanlin LI Weijing YU Qun GE Yinlin |
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| Affiliation: | (Department of Biochemistry and Molecular Biology,Qingdao University Medical College,Qingdao 266021,China) |
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