香豆雌酚对体外破骨细胞分化和骨吸收活性的影响

目的：观察植物雌激素香豆雌酚对破骨细胞的影响，分析其抗骨质疏松的作用方式。 方法：实验于2005-07／2006-03在东南大学医学院临床实验中心和分子影像实验室、南京师范大学物理实验中心完成。以1，25（OH）2D3诱导大鼠骨髓细胞形成破骨样细胞，通过相差显微镜下的形态观察，抗酒石酸酸性磷酸酶染色和骨片上骨吸收陷窝的形成来鉴定破骨细胞。分别加入0，10^-9，10^-8，10^-7，10^-6，10^-5mol／L香豆雌酚，以10^-9mol／L 17 β-雌二醇为阳性对照，于培养3,6和9d分别计数抗酒石酸酸性磷酸酶阳性细胞个数，磷酸苯二钠法测定破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶的活性，于培养12d利用图像分析系统对骨吸收陷窝的面积进行测量分析，原子吸收光谱法测定破骨细胞和骨片联合培养的上清中钙的浓度。 结果：①利用1，25（OH）2D3成功诱导出破骨样细胞。②香豆雌酚抑制破骨细胞的形成和分化：随香豆雌酚浓度增加，每孔抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性的破骨细胞数量呈剂量依赖性减少（香豆雌酚10^-9,10^-8，10^-7，10^-6,10^-5 mol／L组分别为357&;#177;8，347&;#177;11，303&;#177;17，275&;#177;18，268&;#177;6，空白对照组为360&;#177;15，17 β-雌二醇组为200&;#177;12，P＜0．05）。③破骨细胞噬骨活性：骨吸收陷窝面积香豆雌酚各浓度组与空白对照组相比均有显著下降，香豆雌酚10^-9与10^-8，10^-7，10^-6,10^-5 mol／L组之间，香豆雌酚10^-8，10^-7mol／L组与10^-6，10^-5mol／L组之间差异均有显著性。④破骨细胞和骨片联合培养的上清中钙的浓度;应用香豆雌酚10^-8～10^-5mol/L处理后共培养体系中的钙浓度与空白对照组相比分别下降了24．7％，36.2％，36．9％，39．1％。 结论：香豆雌酚可通过抑制破骨细胞的形成、抗酒石酸酸性磷酸酶的活性和骨吸收作用，抑制破骨细胞分化和骨吸收活性，从而具有抗骨质疏松作用。

Effect of coumestrol on in vitro differentiation of osteoclast and activity of bone resorption