| 实验犬浅静脉内皮细胞原位获取及体外培养 |
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| 引用本文： | 施德兵,符伟国,何红兵,刘震杰,张祥满,史振宇. 实验犬浅静脉内皮细胞原位获取及体外培养[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2008, 12(20): 3831-3836 |
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| 作者姓名： | 施德兵 符伟国 何红兵 刘震杰 张祥满 史振宇 |
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| 作者单位： | 复旦大学附属中山医院血管外科,上海市,200032 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 背景:自体血管内皮细胞数量有限且体外长期培养传代后存在功能老化,是目前制约组织工程血管发展的问题.目的:实验拟验证通过体外分离和大规模培养方式为组织工程动脉支架体外内皮化提供血管内皮细胞的可行性.设计、时间及地点:重复测量设计,实验于2007-03/12在复旦大学附属中山医院中心实验室完成.材料:健康杂种犬6只,雌雄不拘,体质量35～40kg,用于获取血管内皮细胞.方法:将犬麻醉后前肢隐静脉原位插管,采用Ⅰ型胶原酶消化法获取血管内皮细胞,体外培养、传代并大规模扩增.采用微格法每日计数培养的细胞总数.主要观察指标:倒置显微镜观察细胞生长情况,透射电镜和细胞免疫化学进行细胞鉴定,检测原代和传代细胞的条件培养液中6-酮-前列腺素F1°和Ⅷ因子相关抗原的含量.结果:倒置显微镜下观察静脉内皮细胞呈典型的"纺锤样"梭形细胞,单层细胞贴壁生长至融合时呈铺路石样排列.透射电镜下见内皮细胞胞浆中特征性Weibel-Palade小体.细胞免疫化学显示血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原抗体染色阳性.原代及传代细胞培养上清液中6-酮-前列腺素F1°和Ⅷ因子相关抗原的含量差异无显著性意义(P＞0.05).结论:实验成功培养、传代并大规模扩增静脉血管内皮细胞.所培养的静脉内皮细胞可以为组织工程动脉支架体外内皮化提供足够数量和功能良好的细胞.
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| 关 键 词： | 组织工程 犬 内皮细胞 体外培养 原位获取 实验犬 静脉内皮细胞 体外培养 vein canine adult derived endothelial cells in vitro culture harvest 意义 差异 细胞培养上清液 阳性 染色 抗原抗体 Ⅷ因子相关抗原 显示 特征 细胞胞浆 |
| 文章编号： | 1673-8225(2008)20-03831-04 |
| 修稿时间： | 2008-03-04 |
In situ harvest and in vitro culture of endothelial cells derived from adult canine superficial vein |
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| Shi De-bing,Fu Wei-guo,He Hong-bing,Liu Zhen-jie,Zhang Xiang-man,Shi Zhen-yu. In situ harvest and in vitro culture of endothelial cells derived from adult canine superficial vein[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2008, 12(20): 3831-3836 |
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| Authors: | Shi De-bing Fu Wei-guo He Hong-bing Liu Zhen-jie Zhang Xiang-man Shi Zhen-yu |
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