| 重组Klenow-HSA融合蛋白的构建、纯化及其稳定性 |
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| 引用本文： | 曾令娥,黄晶,白惠卿,范慧,黄大无,王露. 重组Klenow-HSA融合蛋白的构建、纯化及其稳定性[J]. 北京大学学报(医学版), 2002, 34(6): 684-687. DOI: 10.3321/j.issn:1671-167X.2002.06.011 |
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| 作者姓名： | 曾令娥 黄晶 白惠卿 范慧 黄大无 王露 |
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| 作者单位： | ^A北京医学高等专科学校,北京,101300^B北京医学高等专科学校^C1981^D1%^A北京大学基础医学院免疫学系^B北京大学^C1447^D2 |
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| 摘 要： | 目的:提高Klenow酶的热稳定性和储藏稳定性.方法:利用PCR的方法扩增DH5α染色体DNA,构建编码Klenow和人血清白蛋白第三功能区(HSA-D3)的融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中获得高效表达.分别对Klenow酶和Klenow-HSA融合蛋白进行纯化,并进行活性及稳定性的研究.结果:发现Klenow-HSA融合蛋白在大肠杆菌中呈可溶性表达.体外实验证实这种融合蛋白具有与Klenow聚合酶相同的活性,其稳定性明显提高.结论:融合蛋白确实能增加Klenow酶的热稳定性和储存稳定性,为研制新一代高稳定性Klenow酶提供了基础.
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| 关 键 词： | DNA聚合酶 Ⅰ/生物合成 人血清白蛋白 重组融合蛋白质类/生物合成 DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段 |
| 文章编号： | 1671-167X(2002)06-0684-04 |
Construction, purification and stability of the fusion recombinant protein Klenow-HSA |
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