脂质体法和电穿孔法体外转染SD大鼠视网膜Mller细胞的比较 |
| |
引用本文: | 曾琦,夏晓波.脂质体法和电穿孔法体外转染SD大鼠视网膜Mller细胞的比较[J].国际眼科杂志,2010(2):247-249. |
| |
作者姓名: | 曾琦 夏晓波 |
| |
作者单位: | 中南大学湘雅医院眼科; |
| |
摘 要: | 目的:探讨脂质体法及电穿孔法介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染体外培养的视网膜Mller细胞的可行性和区别。方法:体外培养出生后7~10d的SD大鼠视网膜Mller细胞,免疫荧光染色法鉴定95%以上为视网膜Mller细胞。分别用阳离子脂质体Lipofectamine2000介导的脂质体转染法和电穿孔法将质粒PEGFP-N1转染视网膜Mller细胞,荧光显微镜下检测转染后1,2,3,4d的转染效率,并持续观察至转染后14d,比较两者基因表达持续时间。结果:荧光显微镜下检测转染后1d,两组均可见少量细胞表达EGFP绿色荧光蛋白。转染后2d,两者转染效率均达到最大,并且电穿孔法介导质粒PEGFP-N1转染Mller细胞效率约为31.0%±2.8%,较脂质体法转染效率(10.5%±2.4%)更高。两者比较有统计学意义(P<0.01)。随后,两者转染效率均逐渐降低。电穿孔转染后的PEGFP-N1可在视网膜Mller细胞内持续表达近14d,而脂质体转染后仅能表达约7d。结论:脂质体法和电穿孔法均适用于视网膜Mller细胞的基因转染,但电穿孔法效率更高,表达时间更长。
|
关 键 词: | 脂转染 电穿孔 基因转染 视网膜Mller细胞 增强型绿色荧光蛋白基因 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|