| 超声介导微泡破裂增强体外基因转染的方法学研究 |
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| 引用本文： | 陈智毅,谢明星,王新房,吕清.超声介导微泡破裂增强体外基因转染的方法学研究[J].中国医学影像技术,2008,24(9):1337-1340. |
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| 作者姓名： | 陈智毅 谢明星 王新房 吕清 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院超声影像科,湖北省分子影像重点实验室,湖北,武汉,430022 |
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| 摘 要： | 目的 对超声促进基因转染的方法进行系统的优化研究,初步确定超声介导微泡破裂(UMMD)增强体外基因转染的最优参数.方法 选用 Ishikawa、Hela 和 MCF-7 3种细胞系为研究对象,用1 MHz超声仪.超声强度为1.0W/cm2,系统研究不同参数下的细胞活力及两种DNA质粒红色荧光蛋白质粒(DsRed)和荧光索酶质粒(pCMV-LUC)的基因转染情况,优化UMMD的转染条件(质粒浓度、占空比及辐照时间),分析SonoVue微泡对基因转染的增强作用.结果 基因转染率随着质粒浓度的增加而增高,当质粒浓度达到30 μg/孔时转染率最高,两种DNA质粒的最佳转染浓度相同.与10%占空比的超声辐照相比,20%占空比的转染率显著提高(P＜0.01).辐照3 min时基因表达率最高,但存活率无明显下降(89.03±2.01)%,为最佳辐照时间.无超声辐照时,单独应用质粒或微泡十质粒的样本几乎不表达红色荧光蛋白.与单纯超声辐照相比,超声辐照联合SonoVue微泡可显著提高基因转染效率(P＜0.01).结论 UMMD的转染参数影响转染效率和细胞活力,优化的参数有利于促进基因转染.
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| 关 键 词： | 超声检查 微泡 基因转染 空化 细胞活力 |
| 收稿时间： | 2008/3/10 0:00:00 |
| 修稿时间： | 6/2/2008 12:00:00 AM |
Methodological study of ultrasound-mediated microbubble destruction enhanced gene transfection in vitro |
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| CHEN Zhi-yi,XIE Ming-xing,WANG Xin-fang and LV Qing.Methodological study of ultrasound-mediated microbubble destruction enhanced gene transfection in vitro[J].Chinese Journal of Medical Imaging Technology,2008,24(9):1337-1340. |
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| Authors: | CHEN Zhi-yi XIE Ming-xing WANG Xin-fang and LV Qing |
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| Institution: | Department of Ultrasonography, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Hubei Province Key Laboratory of Molecular Imaging, Wuhan 430022, China;Department of Ultrasonography, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Hubei Province Key Laboratory of Molecular Imaging, Wuhan 430022, China;Department of Ultrasonography, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Hubei Province Key Laboratory of Molecular Imaging, Wuhan 430022, China;Department of Ultrasonography, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Hubei Province Key Laboratory of Molecular Imaging, Wuhan 430022, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ultrasonography Microbubble Gene transfection Cavitation Cell viability |
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