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Let-7d表达质粒的构建及其对卵巢癌细胞高迁移率A2蛋白及ras蛋白表达的抑制作用
引用本文:叶海燕,陈建国,黄小穗,郭爱林,郝佩佩. Let-7d表达质粒的构建及其对卵巢癌细胞高迁移率A2蛋白及ras蛋白表达的抑制作用[J]. 南方医科大学学报, 2012, 32(12): 1752-1757
作者姓名:叶海燕  陈建国  黄小穗  郭爱林  郝佩佩
作者单位:1. 广东省人民医院//广东省医学科学院妇科,,广东广州510080
2. 广东省人民医院//广东省医学科学院医学研究中心,广东广州,510080
3. 南方医科大学生物技术学院生物技术系暨分子免疫学研究所,广东广州,510515
基金项目:广东省科技计划项目,广东省医学科研基金(A2008004):广东省自然科学基金
摘    要:目的构建let-7d真核表达载体,研究let-7d对卵巢癌细胞生物学行为及蛋白表达的影响。方法根据let-7d序列设计合成
microRNA片段,定向克隆到pcDNATM6.2GW/EmGFPmiR真核表达载体上,运用基因转染技术将其导入卵巢癌IGROV1细胞
中,使let-7d基因过表达,以实时荧光定量PCR验证let-7d及高迁移率A2(HMGA2)基因的表达,并用Western blotting检测相关
蛋白HMGA2的差异表达。以MTT绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡率,分析let-7d对IGROV1细胞增殖生长的影
响。结果成功构建针对靶向let-7d的表达质粒,将表达质粒转染人卵巢癌IGROV1细胞后,明显下调HMGA2的表达水平,而
下调ras蛋白的作用较弱,没有前者明显。细胞表型研究显示,抑制HMGA2表达可能改变该细胞的恶性表型,表现在细胞增殖
能力明显下降,自发凋亡率明显增加等。结论Let-7d通过对HMGA2的调控,在改变卵巢癌IGROV1细胞恶性表型方面可能
起重要作用。


关 键 词:let-7  卵巢癌  高迁移率蛋白A2  ras

Construction of let-7d expression vector and its inhibitory effect on HMGA2 and ras expression in human ovarian cancer cells in vitro
YE Haiyan , CHEN Jianguo , HUANG Xiaosui , GUO Ailin , HAO Peipei. Construction of let-7d expression vector and its inhibitory effect on HMGA2 and ras expression in human ovarian cancer cells in vitro[J]. Journal of Southern Medical University, 2012, 32(12): 1752-1757
Authors:YE Haiyan    CHEN Jianguo    HUANG Xiaosui    GUO Ailin    HAO Peipei
Affiliation:3 Department of Gynecology1,Medical Research Center2,Guangdong General Hospital,Guangdong Academy of Medical Sciences,Guangzhou 510080,China;3Institute of Molecular Immunology,School of Biotechnology,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China
Abstract:
Keywords:
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