LncRNA PVT1/miR-124轴靶向Jagged-1/Notch通路抑制晶状体纤维化的分子机制研究 |
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作者姓名: | 汪涛 张振华 陈文兵 刘建军 张彩霞 吕嘉华 |
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作者单位: | 1. 南京医科大学附属苏州科技城医院眼科;2. 苏州眼耳鼻喉科医院眼科;3. 苏州大学附属第一医院眼科;4. 上海复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科 |
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基金项目: | 江苏省卫生计生委年度面上科研课题项目(H201518); |
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摘 要: | 目的 探究环状LncRNA PVT1调节人晶状体上皮细胞(LECs)纤维化的作用及可能的分子机制。方法 收集新鲜晶状体前囊膜标本,包括前囊下白内障(ASC)手术眼和健康死后眼各9例。体外培养SRA01/04细胞,并分为空白组、TGFβ2组、si-control组、si-PVT1组、si-PVT1+miR-NC组、si-PVT1+miR-124-inhibitor组。除空白组外,其余各组在转染相应序列后,用5 ng·m L-1TGFβ2作用48 h。提取组织或细胞RNA并进行微阵列分析。应用实时荧光定量PCR法检测组织样本或细胞中LncRNA PVT1、miR-124表达。采用双荧光素酶报告系统和RNA结合蛋白免疫共沉淀(RIP)法分析LncRNA PVT1、miR-124、Jagged-1之间的靶向关系。Western blot法检测各组细胞Jagged-1、Notch-1、Notch-2、Notch-3、Snail、Slug、纤维蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)、肌动蛋白α (α-SMA)等蛋白表达。结果 LncRNA PVT1在ASC眼的前囊膜组织或TG...
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关 键 词: | LncRNA PVT1 miR-124 Jagged-1/Notch通路 人晶状体上皮细胞 晶状体纤维化 |
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