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表达胰高血糖素样肽1重组腺伴随病毒载体的构建
引用本文:娄明武,梁冰,张明东,杨广笑,王全颖. 表达胰高血糖素样肽1重组腺伴随病毒载体的构建[J]. 中国神经再生研究, 2011, 15(28): 5299-5302
作者姓名:娄明武  梁冰  张明东  杨广笑  王全颖
作者单位:深圳市龙岗中心医院介入影像科,广东省深圳市 518116,深圳市龙岗中心医院介入影像科,广东省深圳市 518116,深圳市龙岗中心医院介入影像科,广东省深圳市 518116,西安市华广生物工程有限公司,陕西省西安市 710025,西安市华广生物工程有限公司,陕西省西安市 710025
基金项目:广东省科学技术厅资助项目(2005B36001082);深圳市科技和信息局资助项目(JH200505260306A);深圳市龙岗区委组织部2008年专家提升计划资助项目
摘    要:背景:胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)在人体内半衰期过短限制了其应用。目的:构建可表达GLP-1的重组腺伴随病毒。方法:将NT4-GLP-1融合基因插入腺伴随病毒包装质粒pSSHG-CMV中,构建pSSHG/NT4-GLP-1重组腺伴随病毒包装质粒。采用磷酸钙共沉淀法将辅助质粒pAAV/Ad、腺病毒质粒pFG140及pSSHG/NT4-GLP-1转染至293细胞系,用其感染Hela细胞。结果与结论:重组质粒pSSHG/NT4-GLP-1经限制性内切酶EcoRⅠ酶切鉴定可见342 bp的目的片段,说明NT4-GLP-1融合基因已经成功重组于腺伴随病毒包装质粒pSSHG-CMV内。免疫细胞化学结果显示,转染pSSHG/NT4-GLP-1重组腺伴随病毒包装质粒的Hela细胞内有大量棕黄色颗粒,阳性率达到70%以上,说明NT4-GLP-1重组腺伴随病毒在细胞中可以表达GLP-1。

关 键 词:胰高血糖素样肽1;腺伴随病毒;重组质粒;构建;组织构建
收稿时间:2010-08-06
修稿时间:2010-08-06

Construction of a recombinant adeno-associated virus plasmid expressing glucagon-like peptide-1
Lou Ming-wu,Liang Bing,Zhang Ming-dong,Yang Guang-xiao and Wang Quan-yin. Construction of a recombinant adeno-associated virus plasmid expressing glucagon-like peptide-1[J]. Neural Regeneration Research, 2011, 15(28): 5299-5302
Authors:Lou Ming-wu  Liang Bing  Zhang Ming-dong  Yang Guang-xiao  Wang Quan-yin
Abstract:
Keywords:the fusion gene of NT4-GLP-1   adeno-associated viru
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