人腹膜间皮细胞的改良分离及其鉴定

背景：腹膜间皮细胞作为腹膜的重要组分，分泌多种细胞因子，在参与抗炎、免疫调节、腹膜纤维化等方面起着重要作用，如何获得优质、均一的腹膜间皮细胞成为解决这些问题的关键。目的：拟建立改良的人腹膜间皮细胞消化培养法。方法：0.1%胶原酶Ⅰ消化腹部大网膜组织，去除红细胞后用含体积分数为10%胎牛血清的1640培养基培养。在培养过程中以倒置显微镜观察细胞形态变化，CCK-8观察培养液对间皮细胞生长的促进作用，透射电子显微镜观察细胞超微结构，激光共聚焦免疫荧光鉴定细胞。结果与结论：分离培养的细胞为多角形，汇合时呈铺路石样排列，培养细胞的纯度达90%以上；生长良好，迅速，可传代至四五代。透射电子显微镜下见细胞表面大量的微绒毛，免疫荧光显示角蛋白、波形蛋白抗原阳性，白细胞CD45、第Ⅷ因子相关抗原阴性；所有被鉴定特征均符合间皮细胞的特点。结果提示胶原酶Ⅰ消化法是一种简单、高效、重复性高的分离腹膜间皮细胞的方法。

Isolation and identification of improved human peripheral peritoneum mesothelial cells