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人源Fab抗体库的构建和抗HBsAg抗体的筛选和鉴定
引用本文:焦永军,周镇先,曾晓燕,赵红,薛蓉,管晓虹,冯振卿,朱凤才,史智扬.人源Fab抗体库的构建和抗HBsAg抗体的筛选和鉴定[J].免疫学杂志,2008,24(1):61-64,68.
作者姓名:焦永军  周镇先  曾晓燕  赵红  薛蓉  管晓虹  冯振卿  朱凤才  史智扬
作者单位:1. 江苏省疾病预防控制中心卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京,210009
2. 江苏省南京市第二医院,南京,210003
3. 南京医科大学,卫生部抗体技术重点实验室,南京,210029
基金项目:南京市科委社会发展项目
摘    要:目的 构建人源Fab抗体文库,筛选抗HBsAg 抗体片段并进行初步鉴定.方法 收集20份临床检验废弃的成人乙肝感染者淋巴细胞,抽提总RNA ,逆转录成cDNA,构建抗乙肝病毒人源免疫型Fab抗体文库.以HBsAg包板进行4轮循环的吸附-洗脱-扩增,挑单克隆用Phage-ELISA、DNA测序筛选阳性克隆,对阳性克隆进行可溶性表达,并用ELISA对其特异性进行鉴定.结果 构建的人源Fab型抗体文库的库容为2.0×108,并具有良好的多样性.经过4轮筛选,成功获得4株能与HBsAg结合的人源抗体克隆,分别命名为hFabHB1、hFabHB2、hFabHB3 和hFabHB4.对其中的hFabHB1进行可溶性表达,ELISA鉴定阳性.结论 成功构建了抗乙肝病毒人源免疫型Fa b抗体文库,从中筛选获得的4株人源Fab抗体片段有望在乙型肝炎的预防和治疗上发挥作用 .

关 键 词:人源Fab抗体文库  乙型肝炎病毒表面抗原  筛选
文章编号:1000-8861(2008)01-0061-05
收稿时间:2007-09-24
修稿时间:2007-11-15

Construction of human Fab library and characterization of anti-HBsAg Fab fragments generated from the library
JIAO Yong-jun,ZHOU Zhen-xian,ZEN Xiao-yan,ZHAO Hong,XUE Rong,GUAN Xiao-hong,FENG Zhen-qing,ZHU Feng-cai,SHI Zhi-yang.Construction of human Fab library and characterization of anti-HBsAg Fab fragments generated from the library[J].Immunological Journal,2008,24(1):61-64,68.
Authors:JIAO Yong-jun  ZHOU Zhen-xian  ZEN Xiao-yan  ZHAO Hong  XUE Rong  GUAN Xiao-hong  FENG Zhen-qing  ZHU Feng-cai  SHI Zhi-yang
Abstract:
Keywords:Human Fab antibody library  Hepatitis B virus surface antigen  Panning
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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