| 细粒棘球绦虫重组Bb—Eg95-EgA31融合基因疫苗构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 周必英,陈雅棠,李文桂,杨梅.细粒棘球绦虫重组Bb—Eg95-EgA31融合基因疫苗构建及鉴定[J].中国人兽共患病杂志,2009,25(6). |
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| 作者姓名： | 周必英 陈雅棠 李文桂 杨梅 |
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| 作者单位： | 周必英,ZHOU Bi-ying(重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆400016;贵州省遵义医学院寄生虫学教研室,贵州563003);陈雅棠,李文桂,杨梅,CHEN Ya-tang,LI Wen-gui,Yang Mei(重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆,400016)
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| 摘 要： | 目的 构建和鉴定细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31融合基因疫苗.方法 自行设计引物,从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR分别扩增Eg95和EgA31抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Eg95和EgA31,得到Eg95-EgA31融合基因,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切,定向克隆到大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,构建重组质粒pGEX-Eg95-EgA31,抽提质粒进行双酶切鉴定,电穿孔法转化两歧双歧杆菌(Bifidobacteria bifidum,Bb),构建细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定.结果 RT-PCR扩增出约1 016bp的Eg95-EgA31融合基因;重组质粒用双酶切鉴定可切出预期大小片段,以具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提的质粒为模板进行PCR扩增可得到约1 016bp的Eg95-EgA31融合基因片段.结论 成功构建了细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗,为该疫苗的开发利用奠定了实验基础.
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| 关 键 词： | 细粒棘球绦虫 重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗 构建 鉴定 |
Construction and identification of the recombinant fusion gene vaccine Bb-Eg95-EgA31 of Echinococcus granulosus |
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| ZHOU Bi-ying,CHEN Ya-tang,LI Wen-gui,Yang Mei.Construction and identification of the recombinant fusion gene vaccine Bb-Eg95-EgA31 of Echinococcus granulosus[J].Chinese Journal of Zoonoses,2009,25(6). |
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| Authors: | ZHOU Bi-ying CHEN Ya-tang LI Wen-gui Yang Mei |
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