基于靶器官铁死亡探讨绿豆汁炙黄药子的炮制减毒机制

目的 探究绿豆汁炙黄药子的炮制减毒作用，并基于其主要毒性靶器官肝铁死亡探究其减毒机制。方法 60只雄性ICR小鼠随机分为空白组、生黄药子组、水炙黄药子组，绿豆汁炙黄药子1组（黄药子-绿豆10∶1，闷润40 min，130 ℃炒18 min）、绿豆汁炙黄药子2组（黄药子-绿豆10∶1，闷润80 min，100 ℃炒14 min）、绿豆汁炙黄药子3组（黄药子-绿豆20∶3，闷润40 min，160 ℃炒14 min）。生黄药子及各炮制品组均以3 g·kg^-1·d^-1的剂量分别灌胃对应的95%乙醇提取物药液，空白组灌胃等体积的0.5%羧甲基纤维素钠，1次/d，连续14 d。苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肝脏组织病理变化；生化检测小鼠血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，以及肝组织丙二醛（MDA）、亚铁离子（Fe²⁺）、还原型谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）的水平；蛋白免疫印迹法检测铁关键蛋白铁蛋白重链1（FTH1）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的表达水平。结果 HE染色结果显示，空白组小鼠肝组织结构清晰，肝细胞形态正常；生黄药子组与水炙黄药子组小鼠肝细胞胞质疏松、空泡，病理性损伤明显；各绿豆汁炙黄药子组小鼠病理性损伤明显改善。与空白组比较，生黄药子组小鼠血清ALT、AST水平显著升高（P<0.01），肝组织MDA及Fe²⁺水平显著升高（P<0.01），GSH、SOD水平显著降低（P<0.01），FTH1、GPX4蛋白表达显著下调（P<0.01）；与生黄药子组比较，各绿豆汁炙黄药子组小鼠血清ALT、AST水平显著降低（P<0.01），肝组织MDA的水平明显降低（P<0.05，P<0.01），Fe²⁺水平显著降低（P<0.01），GSH、SOD水平显著升高（P<0.01），FTH1、GPX4蛋白表达显著上调（P<0.01）；与水炙黄药子组比较，各绿豆汁炙黄药子组小鼠血清AST水平明显降低（P<0.05，P<0.01），肝组织MDA水平显著降低（P<0.01），SOD水平明显升高（P<0.05，P<0.01），FTH1蛋白表达显著上调（P<0.01），绿豆汁炙黄药子2、3组小鼠血清ALT水平显著降低（P<0.01），肝组织Fe²⁺水平显著降低（P<0.01），GSH水平明显升高（P<0.05，P<0.01），GPX4蛋白表达明显上调（P<0.05，P<0.01）。各绿豆汁炙黄药子组中以绿豆汁炙黄药子3组的减毒效果最佳，即黄药子-绿豆=20∶3，闷润40 min，160 ℃炒14 min。结论 绿豆汁炙法能够缓解黄药子导致的肝损伤，其减毒机制可能与抑制其靶器官肝脏的铁死亡有关。

Exploring Detoxication Mechanism of Dioscoreae Bulbiferae Rhizoma Processed with Phaseoli Radiati Semen Juice Based on Target Organ Ferroptosis