UAG联合bFGF和G-CSF治疗糖尿病大鼠后肢缺血的实验研究

目的观察去乙酰化的胃肠激素(unacylated ghrelin,UAG)联合粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)促进2型糖尿病大鼠后肢缺血模型血管新生的作用,并探讨其作用机制。方法建立大鼠糖尿病后肢缺血模型及正常大鼠后肢缺血模型各60只,且各随机分成对照组、bFGF+G-CSF组、UAG+bFGF+G-CSF组各20只。UAG 30umol/kg隔日一次腹腔注射,共14天;连续七天皮下注射G-CSF 10ug/kg;第1、3、5、7、天缺血区肌注bFGF5ug/kg。术后一周,应用ELISA试剂盒测定缺血肌肉组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达。四周后取后肢缺血部位肌肉组织行免疫组化观察CD34阳性表达血管数。结果 MMP9表达及毛细血管计数(1)非糖尿病大鼠,N2 vs N1、N3 vs N1有极显著差异(P<0.01),N2、N3比较无显著差异(P>0.05);(2)糖尿病大鼠各组间比较均有极显著差异(P<0.01);(3)糖尿病大鼠与非糖尿病大鼠分别比较,N1 vsD1、N2 vs D2均有显著差异(P<0.05),UAG输注组无统计学意义(P>0.05)。结论 bFGF联合G-CSF能促进大鼠缺血后肢血管新生,糖尿病大鼠缺血后肢血管新生能力明显弱于正常大鼠,UAG联合bFGF和G-CSF能明显促进糖尿病大鼠缺血后肢血管新生。