miR-335在急性缺血性脑卒中表达下调及对钙调蛋白的调控作用

目的 检测微小RNA-335在急性缺血性脑卒中（AIS）患者血清中的表达，并探讨其对钙调蛋白（CaM）调控的作用机制。 方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法测定106例AIS患者及98例健康对照组血清中miR-335表达情况；用生物信息学数据库查询分析miR-335对钙调蛋白编码基因CALM1的靶向结合关系；脂质体转染法将miR-335模拟物、抑制物以及相应阴性对照物分别转染至人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中并进行细胞培养，采用逆转录PCR（RT-PCR）和Western blot分别检测干预后HUVECs中钙调蛋白mRNA和蛋白的表达水平。 结果 与健康对照组相比较，AIS组患者血清miR-335表达明显下调（P<0.01）；生物信息学软件的查询分析显示CALM1存在miR-335潜在靶向结合位点；RT-PCR和Western blot检测结果显示miR-335模拟物组CaM mRNA和蛋白的表达水平较对照组显著下降（P<0.01），而miR-335抑制物组CaM mRNA和蛋白的表达水平较对照组显著增高（均P<0.05）。 结论 急性缺血性脑卒中患者血清miR-335表达明显下降，表达下调的miR-335可能通过上调钙调蛋白的表达从而发挥重要作用。

Negative Regulation of Calmodulin by miR-335 in Acute Ischemic Stroke