| 癌胚抗原特异性单克隆抗体(Anti-CEA)核酸适配体的筛选 |
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| 引用本文： | 曾家豫,万 波,马 瑾,袁红霞,李 星,赵运旺,廖世奇.癌胚抗原特异性单克隆抗体(Anti-CEA)核酸适配体的筛选[J].南京医科大学学报,2015(6):782-786. |
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| 作者姓名： | 曾家豫 万 波 马 瑾 袁红霞 李 星 赵运旺 廖世奇 |
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| 作者单位： | 西北师范大学生命科学学院,甘肃 兰州 730070,西北师范大学生命科学学院,甘肃 兰州 730070,甘肃省医学科学研究院分子生物中心,甘肃 兰州 730050,甘肃省医学科学研究院分子生物中心,甘肃 兰州 730050,西北师范大学生命科学学院,甘肃 兰州 730070,西北师范大学生命科学学院,甘肃 兰州 730070,甘肃省医学科学研究院分子生物中心,甘肃 兰州 730050 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81360333) |
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| 摘 要： | 目的:筛选癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)特异性单克隆抗体(Anti-CEA)的核酸适配体(aptamers),为肺癌血清肿瘤标志物核酸适配体的筛选奠定实验基础?方法:利用羧基化琼脂磁珠作为筛选介质,以Anti-CEA为筛选的目标靶分子,通过消减SELEX技术及实时定量PCR技术,从随机ssDNA文库中筛选出与Anti-CEA特异性结合的aptamers,并通过凝胶阻滞实验(EMSA)鉴定筛选到的Anti-CEA-aptamer复合物,然后将得到的第10轮富集文库扩增为双链DNA,通过切胶纯化后,连接PMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,同时利用交错PCR技术鉴定阳性克隆,经测序,获得aptamers的序列?结果:经过10轮筛选得到了4条与Anti-CEA结合的aptamers,测序结果显示均为不同序列?结论:验证筛选出的与Anti-CEA结合的aptamer,特异性检测结果表明2号aptamer与靶分子结合的特异性很高,且与非特异蛋白无明显吸附,筛选出的aptamers用于识别Anti-CEA,将为肺癌的早期诊断和早期治疗提供新的突破口?
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| 关 键 词： | 消减SELEX技术 羧基琼脂磁珠 CEA特异性单克隆抗体 核酸适配体 肺癌 |
| 收稿时间： | 2015/1/18 0:00:00 |
Selection of aptamers to Anti-CEA |
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| Zeng Jiayu,Wan Bo,Ma Jin,Yuan Hongxi,Li Xing,Zhao Yunwang and Liao Shiqi.Selection of aptamers to Anti-CEA[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2015(6):782-786. |
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| Authors: | Zeng Jiayu Wan Bo Ma Jin Yuan Hongxi Li Xing Zhao Yunwang and Liao Shiqi |
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| Institution: | College of Life Sciences, Northwest Normal University, Lanzhou 730070,College of Life Sciences, Northwest Normal University, Lanzhou 730070,Laboratory of Molecular Biology, Gansu Academy of Medical Sciences, Lanzhou 730050,China,Laboratory of Molecular Biology, Gansu Academy of Medical Sciences, Lanzhou 730050,China,College of Life Sciences, Northwest Normal University, Lanzhou 730070,College of Life Sciences, Northwest Normal University, Lanzhou 730070 and Laboratory of Molecular Biology, Gansu Academy of Medical Sciences, Lanzhou 730050,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | subtractive SELEX carboxyl magnetic microspheres Anti-CEA aptamer lung cancer |
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