| GCF低表达宫颈癌HeLa细胞系的构建及辐射对其调控IER5基因表达的初步探究 |
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| 引用本文： | 史海敏,丁库克,周平坤,陈丹,郭冬梅,赵春丽,张新. GCF低表达宫颈癌HeLa细胞系的构建及辐射对其调控IER5基因表达的初步探究[J]. 医学研究杂志, 2015, 44(4): 37-41 |
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| 作者姓名： | 史海敏 丁库克 周平坤 陈丹 郭冬梅 赵春丽 张新 |
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| 作者单位： | 110042 沈阳, 辽宁省肿瘤医院妇一科;100883 北京, 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全研究所;100850 北京, 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所放射毒理与辐射危害评价研究室;110042 沈阳, 辽宁省肿瘤医院妇一科;110042 沈阳, 辽宁省肿瘤医院妇一科;110042 沈阳, 辽宁省肿瘤医院妇一科;110042 沈阳, 辽宁省肿瘤医院妇一科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30770573/31170806);北京市自然科学基金资助项目(7092013);沈阳市科技攻关项目(F12193948) |
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| 摘 要： | 目的 构建GCF低表达的宫颈癌HeLa细胞系,在60Co γ射线照射下初步探究其细胞增殖以及调控宫颈癌放射敏感基因IER5的表达。 方法 经带有荧光标记的GCF低表达的质粒稳定转染HeLa细胞, G418筛选,蛋白印迹法、实时定量PCR法鉴定得到GCF-shRNA-HeLa单克隆细胞系。倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法探究不同剂量照射后的细胞增殖情况,在不同照射剂量下用蛋白印迹法检测GCF-shRNA-HeLa及对照细胞中IER5蛋白的表达情况。 结果 成功构建稳定表达的GCF-shRNA-HeLa单克隆细胞系,显微镜下观察GCF-shRNA-HeLa细胞比正常HeLa细胞体积小,细胞间隙较大,其中梭形细胞较多。蛋白印迹法及实时定量PCR验证了GCF-shRNA-HeLa的蛋白表达及mRNA转录水平均低于对照组(P<0.05)。辐射情况下实验结果显示在同一照射剂量、同一时间下GCF-shRNA-HeLa细胞比control对照细胞增殖缓慢(P=0.014)。不同剂量照射情况下蛋白印迹法检测HeLa细胞、control-shRNA-HeLa与GCF-shRNA-HeLa细胞IER5蛋白表达情况,结果同一辐照剂量下GCF沉默的细胞系中IER5的表达量比对照细胞高, 4Gy照射的GCF-shRNA-HeLa的IER5表达量最高(P<0.05)。 结论 本实验构建了低表达GCF的HeLa细胞系,初步探讨GCF作为IER5基因抑制性转录因子的作用。结合临床基因靶向治疗,可寻求可以降低GCF表达的方式,通过上调IER5表达这一双效途径来加速宫颈癌细胞凋亡。
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| 关 键 词： | GCF IER5 HeLa细胞 细胞增殖 |
| 收稿时间： | 2014-10-05 |
| 修稿时间： | 2014-10-20 |
Constructing the Cervical Cancer HeLa Cell Line with Lower Expression of GCF Gene and Gxplore the Radiational Effects of it's Regulating on IER5 Gene |
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| Shi Haimin,Ding Kuke,Zhou Pingkun. Constructing the Cervical Cancer HeLa Cell Line with Lower Expression of GCF Gene and Gxplore the Radiational Effects of it's Regulating on IER5 Gene[J]. Journal of Medical Research, 2015, 44(4): 37-41 |
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| Authors: | Shi Haimin Ding Kuke Zhou Pingkun |
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| Affiliation: | Liaoning Cancer Hosptial, Department of Gynaecology, Liaoning 110042, China;Liaoning Cancer Hosptial, Department of Gynaecology, Liaoning 110042, China;Liaoning Cancer Hosptial, Department of Gynaecology, Liaoning 110042, China;Liaoning Cancer Hosptial, Department of Gynaecology, Liaoning 110042, China;Liaoning Cancer Hosptial, Department of Gynaecology, Liaoning 110042, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GCF IER5 HeLa Cells cell proliferation |
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