多发性骨髓瘤患者间充质干细胞TAZ和Wnt/β-catenin基因表达及其骨潜能的研究

 目的　研究多发性骨髓瘤（MM）患者骨髓间充质干细胞（MSC）成骨诱导后成骨转录共刺激因子（TAZ）和Wnt／β-catenin mRNA的表达，探讨多发性骨髓瘤骨病（MBD）潜在的治疗靶点。方法　体外分离培养10例初治MM患者及10名健康对照者骨髓MSC，体外诱导分化为成骨细胞，茜素红实验检测矿化物沉积、荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测骨桥蛋白（OPN）、骨钙素（OC）、碱性磷酸酶（ALP）、核心结合因子α1（Cbfα1）mRNA的表达，分析成骨细胞分化指标变化；荧光定量RT-PCR方法检测成骨细胞的TAZ、Wnt／β-catenin mRNA，分析两组间TAZ和Wnt／β-catenin mRNA表达差异。结果　骨髓MSC 体外成骨诱导后，茜素红染色阳性，呈现明显红色钙化结节；实验组MSC 诱导后与诱导前相比，成骨细胞分化指标OC、ALP、Cbfα1 mRNA表达增高（2.0958±0.5665、2.6670±0.3847、0.8463±0.3473）比（1.3487±0.9291、1.1452±0.6054、0.4439±0.2945）]（t值分别为2.171、6.709、2.795；均P＜0.05）；对照组MSC 诱导后与诱导前相比，成骨细胞分化指标OPN、OC、ALP、 Cbfα1 mRNA表达增高（2.1096±0.8267、2.8991±0.3531、4.3045±0.2844、1.3273±0.4075）比（1.2200±0.9091、0.8780±0.3927、1.9161±0.2684、0.6736±0.2513）]（t值分别为2.289、12.103、25.134、4.411；均P＜0.05）。MSC 体外诱导成骨细胞，实验组与对照组相比，成骨指标OPN、OC、ALP、Cbfα1 mRNA表达降低（1.2710±0.5636、2.0958±0.5665、2.6670±0.3847、0.8463±0.3473）比（2.1096±0.8267、2.8991±0.3531、4.3045±0.2844、1.3273±0.4075）]（t值分别为-2.650、-3.805、-10.822、-2.841；均P＜0.05）。实验组骨髓MSC体外成骨诱导后TAZ、β-catenin mRNA（2.2315±1.0723、0.5801±0.2159）比对照组（4.4140±0.8325、0.9516±0.292）表达降低（t值分别为-5.085、-3.235；均P＜0.05）。结论　骨髓MSC 体外诱导细胞OPN、OC、ALP、Cbfα1 mRNA表达增高，成功诱导分化为成骨细胞；MM患者MSC 向成骨细胞分化潜能比健康人降低，TAZ和Wnt／β-catenin 基因可作为MBD的潜在治疗靶点。