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| 人诱导性多能干细胞的培养及鉴定 | |
| 引用本文： | 冯年花,谢安,娄远蕾,阮琼芳,郭菲,吴珏,邓志锋,汪泱.人诱导性多能干细胞的培养及鉴定[J].实验与检验医学,2010,28(1):6-8,15. |
| 作者姓名： | 冯年花 谢安 娄远蕾 阮琼芳 郭菲 吴珏 邓志锋 汪泱 |
| 作者单位： | 1. 南昌大学泌尿外科研究所;南昌大学研究生院医学部 2. 南昌大学泌尿外科研究所 3. 南昌大学第二附属医院神经外科,江西南昌,330006 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，江西省自然科学基金 |
| 摘 要： | 目的 建立稳定的人诱导性多能干细胞(iPS细胞)培养体系.方法 取第3～5代的小鼠胚胎成纤维细胞,丝裂霉素C处理后用作饲养层.人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代.倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态;观察拟胚体形成能力;RT-PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况.结果 (1)小鼠胚胎成纤维细胞(MEn为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形.细胞增殖旺盛.(2)生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长.克隆呈圆形或椭圆形,边界清晰.克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核,质比高.RT-PCR结果 显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体(EB).结论 本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能. |
| 关 键 词： | 人诱导性多能干细胞 细胞培养 饲养层 |
Culture and identification of human induced pluripotent stem cells |
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