| 细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95疫苗的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 周必英,陈雅棠,李文桂,杨梅.细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95疫苗的构建及鉴定[J].中国地方病学杂志,2009,28(2). |
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| 作者姓名： | 周必英 陈雅棠 李文桂 杨梅 |
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| 作者单位： | 1. 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室工作
2. 重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,400016 |
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| 摘 要： | 目的 构建和鉴定细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(rBb)-Eg95疫苗.方法 自行设计引物,从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR扩增获得Eg95抗原编码基因,采用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切,定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌(E.coli-Bb)穿梭表达载体pGEX-1λT中,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,构建重组质粒pGEX-Eg95.抽提质粒进行双酶切鉴定后,电穿孔转化到Bb中,构建细粒棘球绦虫rBb-Eg95疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定.结果 RT-PCR扩增出471 bp的Eg95抗原编码基因;重组质粒用双酶切鉴定可切出4947 bp的载体片段和471 bp的目的 基因片段:以具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提的质粒为模板进行PCR扩增可得到471 bp的Eg95基因片段.结论 成功构建了细粒棘球绦虫rBb-Eg95疫苗,为该疫苗的开发利用奠定了理论基础.
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| 关 键 词： | 细粒棘球绦虫 疫苗 合成 DNA 重组 |
Construction and identification of recombinant Bb-Eg95 vaccine of Echinococcus granulosus |
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| ZHOU Bi-ying,CHEN Ya-tang,LI Wen-gui,YANG Mei.Construction and identification of recombinant Bb-Eg95 vaccine of Echinococcus granulosus[J].Chinese Jouranl of Endemiology,2009,28(2). |
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| Authors: | ZHOU Bi-ying CHEN Ya-tang LI Wen-gui YANG Mei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Echinococcus granulosus Vaccines synthetic DNA recombinant |
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