大鼠创伤性脑损伤后不同时间神经细胞凋亡的变化

背景：创伤性脑损伤神经细胞存在着细胞凋亡。有研究证实Bcl-2基因参与人脑挫裂伤后神经细胞的凋亡。聚二磷酸腺苷核糖多聚酶(poly adenosine diphosphate ribose polymerase，PARP)是细胞凋亡的一个重要标志。目的：通过对大鼠创伤性脑损伤后PARP降解与DNA片段化的时序关系的研究，了解大鼠创伤性脑损伤后神经细胞凋亡的变化进程。设计：随机对照的实验研究。单位：白求恩军医学院和白求恩国际和平医院。材料：选择Wister大鼠30只。随机分为假手术组5只和脑损伤组25只。方法：采用Feeney等的落体撞击法造成左顶叶局限性脑挫裂伤，落体致伤冲击力为500g&;#183;cm(50g，10cm)，分别于损伤后2，6,12，24,48h处死珀样。分别采用末端标记法测定DNA片段化，免疫组化法检测PARP降解。光镜下观察阳性细胞所在部位及形态，苏木精．伊红染色作对照观察。主要观察指标：损伤后脑皮质PARP降解与DNA片段化阳性细胞数。结果：脑损伤后2h开始出现PARP降解，主要集中于损伤灶边缘部位。6h开始出现DNA片段化，最高密度均集中于损伤灶边缘部位，随时间推移，损伤灶深部区可见散在单个阳性细胞。其中PARP降解高峰出现在12～24h(48～46个阳性细胞／切片，t=-34．434,-41．196,P&;lt;0．001)，DNA片段化出现高峰在24～48h(60～56个阳性细胞／切片，t=-39．430，-61．933,P&;lt;0．001)。结论：创伤性脑损伤后存在细胞凋亡，且PARP降解高峰出现早于DNA片段化。建议在脑损伤早期使用抑制PARP降解的药物，可延缓细胞的凋亡。