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细胞裂解法对单细胞PCR扩增效率的影响
引用本文:易萍,李力,王华,邓兵. 细胞裂解法对单细胞PCR扩增效率的影响[J]. 中国优生与遗传杂志, 2005, 13(2): 27-28,32
作者姓名:易萍  李力  王华  邓兵
作者单位:1. 第三军医大学大坪医院野战外科研究所,妇产科,重庆,400042
2. 第三军医大学大坪医院野战外科研究所,分子生物学中心,重庆,400042
3. 重庆医科大学附属儿童医院,重庆,400014
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:目的研究细胞裂解法对单细胞PCR扩增效率的影响,寻求较好的细胞裂解方法.方法应用显微分离技术分离单个淋巴细胞,分别使用冻融变性和蛋白酶K裂解法处理单细胞,应用多重PCR同时扩增X染色体特异重复序列(DXZ1)和Y染色体特异重复序列(DYZ1)对单细胞进行性别诊断,比较其扩增效率.结果使用显微操作法获得80个男性淋巴细胞.采用冻融变性处理单细胞,40个淋巴细胞经多重PCR扩增后有32个产生DXZ1和DYZ1两条电泳带,正确率为80%.采用蛋白酶K裂解法,40个淋巴细胞经多重PCR扩增后均产生DXZ1和DYZ1两条电泳带,正确率为100%.两者的扩增效率有显著的差异性(χ2=6.81,P<0.01).结论 Rechitsky等的蛋白酶K裂解法比较简便,费时短,扩增效率高,适合细胞裂解及PCR扩增模板的制备.

关 键 词:单细胞  细胞裂解
文章编号:1006-9534(2005)02-0027-03

The assessment of the amplified efficacy of single cell PCR by diffent lysis buffers
YI Ping,LI Li,WANG Hua,DENG Bing.. The assessment of the amplified efficacy of single cell PCR by diffent lysis buffers[J]. Chinese Journal of Birth Health & Heredity, 2005, 13(2): 27-28,32
Authors:YI Ping  LI Li  WANG Hua  DENG Bing.
Affiliation:YI Ping1,LI Li1,WANG Hua2,DENG Bing3.
Abstract:
Keywords:PCR
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