细胞因子信号转导抑制因子 1对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞 A549损伤的影响

目的 探讨细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞A549损伤的影响.方法 以肺泡上皮细胞A549为研究对象,A549细胞分成正常组、模型组、Vector+模型组、SOCS1+模型组共四组,在细胞中转染pcDNA3.1-SOCS1,给予肺炎链球菌刺激,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中SOCS1 mRNA表达水平,蛋白质印迹法(Western blotting)检测SOCS1蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率和细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(C-caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9(C-caspase-9)蛋白水平,JC-1法检测线粒体膜电位,Western blotting检测胞质和线粒体中细胞色素C(Cytochrome C)蛋白水平.结果 肺炎链球菌刺激后的肺泡上皮细胞A549中SOCS1表达水平下降正常组SOCS1 mRNA(1.00±0.09),模型组SOCS1 mRNA(0.59±0.07)],细胞存活率降低正常组(100.00±9.68)％,模型组(63.47±5.20)％],LDH释放率升高正常组(2.68±0.27)％,模型组(12.30±1.78)％],MDA含量升高正常组(75.61±5.32)nmol/g,模型组(165.92±13.17)nmol/g],SOD活性降低正常组(131.47±12.86)×103U/g,模型组(68.41±6.38)×103U/g],细胞凋亡率和细胞中C-caspase-3、C-caspase-9蛋白水平升高,线粒体膜电位下降,胞质中Cytochrome C蛋白水平升高,线粒体中Cytochrome C蛋白水平下降.pcDNA3.1-SOCS1转染后的肺炎链球菌条件下肺泡上皮细胞A549中SOCS1表达水平升高,细胞活性升高,LDH释放率降低,MDA含量下降,SOD活性升高,细胞凋亡率和细胞中C-caspase-3、C-caspase-9蛋白水平降低,线粒体膜电位升高,线粒体中Cytochrome C蛋白水平升高,胞质中Cytochrome C蛋白水平降低.结论 SOCS1减轻肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞A549损伤.

Effect of suppressor of cytokine signal transduction 1 on the damage of alveolar epithelial cells A549 infected by streptococcus pneumoniae