榆栀止血颗粒调控PI3K-Akt通路对子宫出血大鼠的保护作用

【摘要】 目的 探讨榆栀止血颗粒(YZZXKL)对子宫出血大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的调控及对子宫的保护作用。 方法 将SD雌性孕鼠灌胃给予米非司酮(13.8 mg/kg)和米索前列醇片(135 μg/kg)复制大鼠子宫出血模型，随机分为模型组（Model组）、YZZXKL低（4 g/kg）、高（16 g/kg）剂量组、PI3K/Akt通路抑制剂LY294002组(LY组，0.3 mg/kg)、YZZXKL+LY组（16 g/kg+0.3 mg/kg），各组10只。另取10只灌胃给予等量生理盐水为正常对照组（Normal组）。造模成功后，Normal组和Model组灌胃和腹腔注射给予生理盐水10 mL/kg,各药物处理组分别灌胃给予相应剂量YZZXKL或腹腔注射给予LY,1次/d,共7 d。给药期间于大鼠阴道置入棉球检测子宫出血量（UBQ）；末次给药24 h后，处死大鼠，取血清和子宫组织，酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清雌二醇（E2）、孕酮（P）；半自动凝血分析仪检测凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)含量；苏木精-伊红试剂（HE）染色观察子宫组织形态；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测子宫组织PI3K、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP-1）蛋白相对表达水平。 结果 与Normal组相比，Model组和YZZXKL+LY组大鼠子宫组织可见间质纤维化及炎性细胞浸润等病理损伤，血清E2、P、FIB含量、子宫组织PI3K、p-Akt、eNOS、VEGF蛋白表达水平均降低 (P＜0.05)，UBQ、凝血指标TT、PT及APTT、MMP-2蛋白表达均升高 (P＜0.05)。与Model组和YZZXKL+LY组相比，YZZXKL低、高剂量组大鼠子宫组织病理损伤减轻，E2、P、FIB、PI3K、p-Akt、eNOS、VEGF蛋白表达水平均升高 (P＜0.05)，UBQ、TT、PT、APTT、MMP-2蛋白表达均降低 (P＜0.05)，且YZZXKL各剂量组上述指标呈剂量依赖性；而LY组大鼠子宫组织病理损伤加重，E2、P、FIB、PI3K、p-Akt、eNOS、VEGF水平均降低 (P＜0.05)，UBQ、TT、PT、APTT、MMP-2水平均升高 (P＜0.05)。Model组和YZZXKL+LY组相比，上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 YZZXKL可提高子宫异常出血大鼠凝血功能和激素水平，改善出血情况，其作用机制可能通过激活PI3K/Akt/eNOS通路，促进血管生成实现。

Protective effect of Yuzhi Zhixue Granule regulating PI3K Akt pathway on uterine bleeding model rats