基因防龋疫苗构建及其在哺乳动物细胞中的表达特征

背景：葡聚糖结合蛋白B(gbpB)具有良好的免疫原性，但能否作为免疫防龋的候选基因疫苗有待研究。目的：观察gbpB真核表达质粒在哺乳动物细胞COS-7的表达情况。设计：设立对照的实验研究。地点和对象：实验在解放军第四军医大学口腔医学院牙体病科完成，对象为Pbs-gbpB质粒(本实验室构建)。干预：通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3．1( )-gbpB，脂质体转染法将其转染至COS-7细胞。免疫组化SABC法检测，DAB显色。主要观察指标：转染后细胞胞浆、胞核着色情况。结果：pcDNA3．1( )-gbpB质粒转染的细胞胞浆中呈棕黄色染色，胞核中无着色，pcDAN3．1( )空载体转染的细胞胞浆及胞核无着色，空白对照组也无着色。结论：质粒pcDNA3．1( )-gbpB转染COS-7后能够在细胞内翻译、表达，表达的蛋白质位于胞浆中，可与抗GbpB抗体特异性结合，具有抗原性，可作为基因疫苗。