重组人促甲状腺激素β亚基的切胶纯化及多克隆抗体制备 |
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作者姓名: | 李敬华 柳明波 马彦 左爱军 孙蓓 梁东春 郭刚 |
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作者单位: | 天津医科大学代谢病医院/内分泌研究所,卫生部及天津市激素与发育重点实验室,天津,300070 |
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基金项目: | 天津市"重中之重"学科建设专项基金 |
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摘 要: | 目的:切胶纯化重组人促甲状腺激素亚基(hTSHβ),免疫家兔制备多克隆抗体,为人TSH测定试剂盒的国产化奠定基础。方法:将含有重组人促甲状腺激素β亚基(hTSHβ)的大肠杆菌表达产物进行SDS-PAGE分离,切取相应分子量的蛋白条带,研磨回收后用于免疫新西兰大耳朵白兔,ELISA监测血清中抗hTSHβ抗体的效价,饱和硫酸铵沉淀及亲和层析自血清中纯化抗体。结果:切胶后获得了高纯度的重组GST-hTSHβ蛋白,所免疫家兔产生了针对hTSHβ的多克隆抗体,效价可达1:12000。结论:切胶纯化的重组hTSHβ蛋白可成功诱导兔产生高效价的抗hTSHβ多克隆抗体。
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关 键 词: | 人促甲状腺激素 免疫 人促甲状腺激素抗体 重组蛋白 |
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