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基因芯片技术鉴定出血性大肠杆菌O157:H7和霍乱弧菌O139
引用本文:徐晓静,文思远,陈苏红,马学恩,王华,王升启. 基因芯片技术鉴定出血性大肠杆菌O157:H7和霍乱弧菌O139[J]. 军事医学科学院院刊, 2006, 30(2): 122-126,130
作者姓名:徐晓静  文思远  陈苏红  马学恩  王华  王升启
作者单位:1. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018
2. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850
3. 内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018
基金项目:国家"火炬计划"
摘    要:目的:建立一种同时快速检测肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7和霍乱弧菌O139的基因芯片,并验证该芯片的特异性和敏感性.方法:选择EHEC O157:H7的产志贺样毒素基因stx1、stx2和β-葡糖醛酸糖苷酶基因(uidA);霍乱弧菌O139的肠毒素A亚单位(ctxA)、毒力协调菌毛A亚单位(tcpA)、糖基转移酶(glycosotransferase LPSgt)基因序列分别设计引物和探针,反向引物用荧光素Cy3标记,探针在3′端氨基修饰.在优化的PCR和杂交反应条件下,分别进行三重PCR扩增,产物混合后与芯片进行杂交,产生特异性荧光信号,进一步筛选探针.随后将筛选出的探针制备芯片用于检测临床样本.结果:PCR产物在相应探针处均产生特异性杂交信号,临床样本检测结果表明,此芯片比常规细菌学检测方法灵敏.结论:所研制的同时定性检测EHEC O157:H7和霍乱弧菌O139的基因芯片是特异、灵敏而且快速的,为这两种肠道致病菌感染的快速诊断提供了新的方法.

关 键 词:基因芯片  多重PCR  大肠杆菌O157:H7  霍乱弧菌O139
文章编号:1000-5501(2006)02-0122-06
收稿时间:2005-06-05
修稿时间:2005-06-05

Detection and identification of enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 and Vibrio cholerae O139 using genechip technology
XU Xiao-Jing,WEN Si-Yuan,CHEN Su-Hong,MA Xue-En,Wang Hua,WANG Sheng-Qi. Detection and identification of enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 and Vibrio cholerae O139 using genechip technology[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2006, 30(2): 122-126,130
Authors:XU Xiao-Jing  WEN Si-Yuan  CHEN Su-Hong  MA Xue-En  Wang Hua  WANG Sheng-Qi
Affiliation:1. Institude of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;2. School of Animal Science and Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Huhhot 010018, China
Abstract:
Keywords:
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