| Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达鼠IL-4受体拮抗体蛋白的研究 |
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| 引用本文： | 田代印,符州,王晓芳,王莉佳.Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达鼠IL-4受体拮抗体蛋白的研究[J].免疫学杂志,2008,24(1):79-82. |
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| 作者姓名： | 田代印 符州 王晓芳 王莉佳 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属儿童医院呼吸科,重庆,400014 |
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| 摘 要： | 目的 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达鼠IL-4受体拮抗体 (mIL-4RA)蛋白.方法 PCR方法扩增小鼠IL-4 C118截断型基因,定向克隆入转移质粒pFastBacHTB中,转化感受态DH10Bac细胞,在DH10Bac细胞内重组pFastBacHTB与杆粒发生转座.筛选阳性克隆,提取重组杆粒,转染sf9昆虫细胞株,获取完整重组杆状病毒.反复感染sf9细胞,扩增病毒同时表达目的 蛋白;用ELISA方法进行蛋白鉴定并初步定量.结果 经核苷酸序列测定及PCR方法,鉴定成功获得含mIL-4RA基因的重组杆粒;通过杆粒转染后sf9细胞所表现出来的细胞病变,推断成功转染并获得重组杆状病毒;最后ELISA方法初步定量sf9细胞培养上清中mIL-4RA蛋白表达量为(1.15±0.12) ng/mL.结论 本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达mIL-4RA蛋白,为进一步研究其生物学活性及功能奠定了实验基础,同时亦为其他蛋白质的真核表达提供了方法学的参考.
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| 关 键 词： | 白细胞介素4 受体拮抗体 杆状病毒 真核表达 |
| 文章编号： | 1000-8861（2008）01-0079-04 |
| 收稿时间： | 2007-03-01 |
| 修稿时间： | 2007-05-10 |
Expression of mouse interleukin 4 receptor antagonist with Bac-to-Bac baculovirus expression system |
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| TIAN Dai-yin,FU Zhou,WANG Xiao-fang,WANG Li-jia.Expression of mouse interleukin 4 receptor antagonist with Bac-to-Bac baculovirus expression system[J].Immunological Journal,2008,24(1):79-82. |
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| Authors: | TIAN Dai-yin FU Zhou WANG Xiao-fang WANG Li-jia |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interleukin 4 Receptor antagonist Baculovirus Eukaryotic expression |
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